HPTLC-bioautographie : développements, criblage d’espèces végétales de la famille des Pittosporaceae et tests innovants
Auteur / Autrice : | Valentin Hilaire |
Direction : | Xavier Fernandez, Anne Landreau |
Type : | Thèse de doctorat |
Discipline(s) : | Chimie |
Date : | Soutenance le 10/12/2021 |
Etablissement(s) : | Université Côte d'Azur |
Ecole(s) doctorale(s) : | École doctorale Sciences fondamentales et appliquées (Nice ; 2000-....) |
Partenaire(s) de recherche : | Laboratoire : Institut de chimie (Nice) |
Jury : | Président / Présidente : Véronique Michelet |
Examinateurs / Examinatrices : Xavier Fernandez, Anne Landreau, Véronique Michelet, Gaëtane Wielgosz-Collin, Pierre Chalard, Grégory Michel | |
Rapporteurs / Rapporteuses : Gaëtane Wielgosz-Collin, Pierre Chalard |
Mots clés
Mots clés contrôlés
Mots clés libres
Résumé
Cette thèse porte sur l’étude d’une méthode de criblage de bio activités de composés naturels en plein essor : l’HPTLC-bioautographie. C’est une technique couplant une séparation chromatographique et des tests d’activité biologique. La séparation des composés naturels de l’extrait à tester va s’effectuer sur une plaque d’HPTLC et cette même plaque développée va être révélée par différentes méthodes permettant de tester les activités biologiques des composés. Généralement, il existe plusieurs catégories de tests utilisables : les tests antimicrobiens, les tests enzymatiques et les tests chimiques (notamment la recherche d’antioxydants). Ce travail résulte d’un partenariat (CIFRE) entre Université Côte d’Azur et la société BotaniCert, spécialisée dans l’analyse phytochimique. La demande de la société BotaniCert souhaitant se pourvoir en méthodes de criblage d’activités a conduit à la recherche des tests d’HPTLC-bioautographie existants et développables dans un laboratoire de chimie (certains tests antimicrobiens nécessitent la manipulation d’organismes pathogènes et ne sont effectuables que dans des laboratoires adaptés). Le choix de certaines pathologies découlant d’une demande en recherche et développement a mené à l’adaptation au laboratoire de BotaniCert des plusieurs tests de criblage enzymatiques (α-glucosidase, acétylcholinestérase, lipase pancréatique) ainsi que de deux tests antimicrobiens (Bacillus subtilis et Aliivibrio fischeri). L’adaptation de ces tests s’est accompagnée du criblage de plusieurs espèces du genre Pittosporum. Le troisième volet de ce travail de thèse a porté sur le développement d’un nouveau test en HPTLC-bioautographie. Celui-ci est le fruit d’un partenariat avec l’équipe 6 du C3M de l’Hôpital l’Archet de Nice et porte sur le criblage de composés anti-leishmaniens. En effet les protozoaires n’ont jamais fait l’objet de développements de tests de criblage par HPTLC-bioautographie. Deux tests ont vu le jour, chacun sur une des deux formes du parasite Leishmania infantum : la forme promastigote extracellulaire et la forme amastigote intracellulaire. Ces deux formes ayant des conditions de survie très différentes, les deux tests ont été développés selon deux techniques différentes : la bioautographie directe pour la forme promastigote et la bioautographie par agar overlay pour la forme amastigote.