Mécanisme, catalyse et spécificité structurale des méthionine sulfoxyde réductases de classe B et la protéine PilB de Neisseria meningitidis
Auteur / Autrice : | Fabrice Neiers |
Direction : | Guy Branlant |
Type : | Thèse de doctorat |
Discipline(s) : | Enzymologie Moléculaire |
Date : | Soutenance le 07/09/2007 |
Etablissement(s) : | Nancy 1 |
Ecole(s) doctorale(s) : | BioSE |
Partenaire(s) de recherche : | Laboratoire : Laboratoire de Maturation des ARN et Enzymologie Moléculaire |
Jury : | Président / Présidente : Jacques Magdalou |
Examinateurs / Examinatrices : Guy Branlant, Jacques Magdalou, Bernard Badet, Daniel Kern, Manh Thong Cung, Bertrand Friguet, Sandrine Boschi-Muller, Frédérique Tête-Favier | |
Rapporteurs / Rapporteuses : Bernard Badet, Daniel Kern |
Mots clés
Mots clés contrôlés
Mots clés libres
Résumé
Les méthionine sulfoxyde réductases (Msr) sont des enzymes ubiquitaires impliquées dans la résistance au stress oxydant, les processus de vieillissement mais également dans la virulence de certaines bactéries pathogènes. Deux classes de Msr : MsrA et MsrB, structuralement distinctes, catalysent respectivement la réduction des stéréoisomères S et R de la fonction sulfoxyde de la méthionine sulfoxyde selon un même mécanisme catalytique en trois étapes impliquant la formation d’un intermédiaire acide sulfénique suivie de celle d’un pont disulfure intramoléculaire ensuite réduit par la thiorédoxine (Trx). Des études de relation structure-fonction, ont permis 1) de caractériser les résidus du site actif de la MsrB de Neisseria meningitidis (N. meningitidis) impliqués dans la reconnaissance du substrat, et dans la catalyse de l’étape réductase conduisant à la formation de l’intermédiaire acide sulfénique, et de proposer un scénario pour la catalyse de l’étape réductase dans lequel le résidu His 103 joue un rôle majeur de catalyseur acide / base; 2) de caractériser le mécanisme des autres sous-classes de MsrB, qui diffèrent de la sous-classe représentée par la MsrB de N. meningitidis par l’absence de la Cys de régénération en position 63, notamment celui de la MsrB de Xanthomonas campestris, qui possède une Cys de régénération en position 31 située dans une boucle flexible ; et 3) de caractériser la protéine PilB de N. meningitidis, protéine à trois domaines, localisée dans le périplasme portant non seulement les activités MsrA et MsrB mais aussi une activité disulfure oxydoréductase au niveau de son domaine N-terminal dont le rôle est de régénérer les activités Msr.