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Thèse soutenue

Structure et expression d'un complexe multienzymatique formé de neuf aminoacyl-tARN synthétases de mammifères : clonage de sa composante méthionyl-tARN synthétase

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Auteur / Autrice : Myriam Lazard
Direction : Jean-Pierre Waller
Type : Thèse de doctorat
Discipline(s) : Biochimie
Date : Soutenance en 1988
Etablissement(s) : Paris 11
Partenaire(s) de recherche : Autre partenaire : Université de Paris-Sud. Faculté des sciences d'Orsay (Essonne)
Jury : Président / Présidente : Jeannine Yon-Kahn
Examinateurs / Examinatrices : Jeannine Yon-Kahn, Richard Giegé, Jean-Pierre Waller, Mathias Springer, Pierre Fromageot
Rapporteurs / Rapporteuses : Richard Giegé, Mathias Springer

Résumé

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Les travaux présentés dans cette thèse concernent l'étude d'un complexe multienzymatique d'origine mammifère, composé des neuf aminoacyl-tARN synthétases spécifiques des acides aminés arginine, acide aspartique, acide glutamique, glutamine, isoleucine, leucine, lysine, méthionine et praline. L'étude comparative des composantes isoleucyl- et méthionyl-tARN synthétases, purifiées à homogénéité respectivement sous forme native ou tronquée par protéolyse, a permis de proposer un modèle d'assemblage des aminoacyl-tARN synthétases. Selon ce modèle, l'assemblage de ces enzymes se fait par l'intermédiaire d'un domaine hydrophobe indépendant du domaine catalytique. Des études réalisées in vivo démontrent que la biosynthèse des méthionyl- et phénylalanyl tARN synthétases peut être sélectivement déréprimée lorsque des cellules ovariennes de hamster chinois sont carencées en leur acide aminé respectif. L'intégration au sein du complexe multienzymatique de la méthionyi-tARN synthétase néosynthétisée au cours d'une carence en méthionine soulève le problème de la topologie du complexe multienzymatique. Le clonage de fragments d'ADNc codant les méthionyl -, lysyl- et aspartyl-tARN synthétases, par criblage immunologique d'une banque d'ADNc foie de rat construite dans le vecteur λgt11, est décrit. La caractérisation d'un clone contenant un ADNc de 401 pb, assigné à la méthionyl-tARN synthétase, a été poursuivie.