Effet de l'extrait de bois de châtaignier sur la modulation de la réponse inflammatoire chez l'hôte

Effect of chestnut wood extract on response modulationinflammatory in the host

• Auteur / Autrice : Dylan Lambert
• Direction : Samir Jawhara, Muriel Billamboz
• Type : Projet de thèse
• Discipline(s) : Sciences de la vie et de la santé - FST
• Date : Inscription en doctorat le 01/05/2023
• Etablissement(s) : Université de Lille (2022-....)
• Ecole(s) doctorale(s) : École graduée Biologie-Santé (Lille ; 2000-....)
• Partenaire(s) de recherche : Laboratoire : UGSF - Unité de Glycobiologie Structurale et Fonctionnelle
• Partenaire(s) de recherche : Equipe de recherche : Glycobiologie in Fungal pathogenesis and Clinical Applications

Mots clés

Mots clés libres

Inflammation

Extrait de bois de Chataignier

Maladie de crohn

Inflammation

Chestnut wood extract

Crohn's disease

Résumé

Notre étude préliminaire menée sur les macrophages ayant un gène reporter NF-ΚB-luciférase et stimulés par LPS met en évidence que l'EBC réduit significativement l'expression de NF-KB dose-dépendante. Cette observation nous permettra de réaliser à grande échelle un criblage de molécules purifiés de l'EBC afin de caractériser les composés anti-inflammatoires identifiés dans cet extrait. Par ailleurs, nous allons déterminer l'effet de l'EBC sur la modulation de l'expression de cytokines (IL-1b, TNF-a, IL-6, IL-10, IL-12), les chimiokines pro- inflammatoires (IL-8, CCL2, CXCL10), les récepteurs de l'immunité innée (MBL, TLRs, Dectine) ainsi que les médiateurs de la voie de signalisation dans les macrophages stimulés par LPS. Dans le modèle intestinal in vitro, les cellules intestinales humaines Caco 2 seront exposées au DSS afin d'induire une réponse inflammatoire et de détériorer les jonctions serrées de ces cellules. Par ailleurs, ces cellules intestinales seront traitées par l'EBC. Le but de ce travail est d'analyser l'impact de l'EBC sur la modulation de l'expression des médiateurs de l'inflammation (chimiokines 5 et cytokines pro-inflammatoires) dans les cellules intestinales Caco-2 exposées au DSS. Nous allons également s'intéresser à l'effet de l'EBS sur la migration de macrophages à travers de cellules intestinales Caco-2 vers C. albicans. Ce modèle se repose sur le chimiotactisme utisant des inserts ayant d'une membrane avec une taille de pores définie. Les cellules intestinales sont ensemencées dans l'insert et les macrophages peuvent migrer à travers de ces cellules intestinales en dessous de l'insert. Ce modèle nous permettra de déterminer l'effet anti-inflammatoire de l'EBC sur la migration de macrophages. L'effet antifongique de l'EBC sera aussi étudié in vitro dans ce projet. Nous allons déterminer la viabilité/croissance de C. albicans en présence de différentes concentrations de l'EBC. La filamentation et la formation de biofilm fongique seront examinées dans cette étude. Ce travail nous permettra de vérifier si l'EBC exerce un effet antifongique contre C. albicans

Our preliminary study conducted on macrophages with a reporter gene NF-ΚB-luciferase and LPS-stimulated evidence that EBC reduces significantly dose-dependent NF-κB expression. This sighting will allow us to carry out large-scale screening of purified molecules of EBC to characterize the anti-inflammatory compounds identified in this extract. In addition, we will determine the effect of EBC on the modulation of expression of cytokines (IL-1b, TNF-a, IL-6, IL-10, IL-12), chemokines pro-inflammatory (IL-8, CCL2, CXCL10), innate immunity receptors (MBL, TLRs, Dectin) as well as signaling pathway mediators in macrophages stimulated by LPS. In the in vitro intestinal model, Caco 2 human intestinal cells will be exposed to DSS to induce an inflammatory response and damage the tight junctions of these cells. Moreover, these intestinal cells will be processed by the EBC. The aim of this work is to analyze the impact of EBC on the modulation of the expression of inflammatory mediators (chemokines 5 and pro-inflammatory cytokines) in intestinal Caco-2 cells exposed to DSS. We will also look at the effect of BSE on the migration of macrophages through intestinal Caco-2 cells to C. albicans. This model relies on chemotaxis using inserts having a membrane with a defined pore size. Intestinal cells are seeded in the insert and macrophages can migrate through from these intestinal cells below of the insert. This model will allow us to determine the anti-inflammatory effect of EBC on macrophage migration. The antifungal effect of EBC will also be studied in vitro in this project. We will determine the viability/growth of C. albicans in the presence of different EBC concentrations. Filamentation and fungal biofilm formation will be examined in this study. This work will allow us to verify if the EBC exerts an antifungal effect against C. albicans