Etude du rôle de la kinase L-WNK1 dans le glomérule - Implication de L-WNK1 dans un modèle de glomérulopathie inflammatoire

Study of the role of L-WNK1 kinase in the glomerulus - Involvement of L-WNK1 in a model of inflammatory glomerulopathy

• Auteur / Autrice : Cyril Mousseaux
• Direction : Juliette Hadchouel
• Type : Projet de thèse
• Discipline(s) : Biologie moléculaire et cellulaire
• Date : Inscription en doctorat le 27/11/2020; Soutenance le 12/10/2022
• Etablissement(s) : Sorbonne université
• Ecole(s) doctorale(s) : École doctorale Physiologie, Physiopathologie et Thérapeutique (Paris ; 2000-....)
• Partenaire(s) de recherche : Laboratoire : Maladies rénales fréquentes et rares (Paris ; 2005-....)

Mots clés

Mots clés libres

L-wnk1

Glomérulopathie

Insuffisance rénale aiguë

L-wnk1

Glomerulopathy

Acute Kidney Injury

Résumé

Les fonctions de l’isoforme long de la kinase With No Lysine 1 (L-WNK1) ont été principalement décrites dans le néphron distal du rein où elle participe à l’homéostasie du sodium et du chlorure. Pourtant, son site d’expression majoritaire à l’état physiologique dans le rein est un autre compartiment : le glomérule. L’objectif de ma thèse était donc d’étudier le rôle de L-WNK1 dans le glomérule à partir d’un modèle animal de glomérulonéphrite extracapillaire (GNEC). Cette maladie glomérulaire se caractérise notamment par une agression podocytaire et une prolifération de cellules pariétales épithéliales. Je montre ici que (1) l’expression de L-WNK1 est majorée dans la GNEC chez l’Homme et la souris et (2) l’inactivation globale du gène L-WNK1 est protectrice au cours d’un modèle murin de GNEC. Cette protection est en partie due à l'expression podocytaire de L-WNK1 puisque son inhibition dans ce type cellulaire atténue également le phénotype de GNEC chez la souris. Plusieurs hypothèses peuvent être émises pour expliquer ce rôle de protecteur podocytaire de l'inhibition de L-WNK1, que j'ai testées in vitro, dans une lignée de podocytes humains immortalisés. J'ai ainsi montré que l’inhibition de l’activité de L-WNK1 réduit la motilité podocytaire in vitro mais ne modifie pas le niveau du flux autophagique. En conclusion, ce travail identifie L-WNK1 comme un nouvel acteur de la GNEC. La place et l’innocuité des inhibiteurs pharmacologiques de L-WNK1 reste à définir.

The functions of the long isoform of the With No Lysine 1 (L-WNK1) kinase have been mainly described in the distal nephron of the kidney, where it participates in sodium and chloride homeostasis. However, its leading expression site in the physiological state of the kidney is in another compartment: the glomerulus. Therefore, my thesis aimed to study the role of L-WNK1 in the glomerulus using an animal model of rapidly progressive glomerulonephritis (RPGN). This glomerular disease is characterized by podocyte aggression and proliferation of parietal epithelial cells. I show here (1) that the expression of L-WNK1 is increased in RPGN in humans and mice and (2) that the global inactivation of the L-WNK1 gene is protective in a mouse model of RPGN. Furthermore, the protective role of L-WNK1 in this context could be due to its expression in podocytes, as its inhibition, specifically in this cell type, also attenuates the RPGN phenotype. Several hypotheses could explain the protective effect of L-WNK1 inhibition: stimulation of autophagy, inhibition of proliferation, and motility. Using a human podocyte cell line, I show that inhibition of L-WNK1 activity reduces podocyte motility without modifying the autophagic flux. In conclusion, this work identifies L-WNK1 as a new player in GNEC. The place and safety of pharmacological inhibitors of L-WNK1 remain to be defined.