Etude de l’effet de Calophyllum calaba L. (1753) sur la cicatrisation des plaies du pied diabétique

Study of the effect of Calophyllum calaba L. (1753) on the healing of diabetic foot wounds

• Auteur / Autrice : Laura Accipe
• Direction : Sylvie Bercion, Rémi Nevière
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Aspects moléculaires et cellulaires de la biologie
• Date : Soutenance le 12/09/2024
• Etablissement(s) : Antilles
• Ecole(s) doctorale(s) : École doctorale Dynamique des environnements dans l'espace Caraïbes-Amériques (Pointe-à-Pitre ; 2022-....)
• Partenaire(s) de recherche : Laboratoire : Connaissance et Valorisation : Chimie des Matériaux, Environnement, Énergie (EA 3592) (Pointe-à-Pitre)
• Jury : Président / Présidente : Maturin Tabue Teguo
• Jury : Examinateurs / Examinatrices : Sylvie Bercion, Rémi Nevière, Maturin Tabue Teguo, François Berthod, Pierre Haddad, Catherine Vonthron-Sénécheau, Henry Joseph
• Jury : Rapporteurs / Rapporteuses : François Berthod, Pierre Haddad

Mots clés

Mots clés contrôlés

Lésions et blessures

Calophyllum calaba

Cultures cellulaires

Aspect moléculaire

Mots clés libres

Cicatrisation

Diabète

Calophyllum calaba

Métalloprotéinases

Produits terminaux de la glycation

Antioxydants

Wound healing

Diabetes

Calophyllum calaba

Metalloprotéinases

Advanced glycation endproducts

Antioxidant

Résumé

Les ulcères du pied diabétique représentent un fléau mondial : ils sont la cause d’une morbidité considérable. Le défaut de cicatrisation retrouvé chez les patients diabétiques est multifactoriel : un dysfonctionnement des cellules impliquées dans la cicatrisation, une augmentation de l’activité des protéases et une augmentation de la formation des produits terminaux de glycation responsables de nombreux effets néfastes. De plus, l’augmentation du stress oxydant via l’accumulation d’espèces réactives de l’oxygène et de l’azote entraine également de nombreux bouleversements à l’état cellulaire. La société Phytobôkaz, a mis en place tout l’itinéraire technique nécessaire pour la commercialisation de l’huile de Calophyllum calaba L., ou galba, connue pour ses propriétés cicatrisantes. Or, on sait que les molécules actives présentes dans l’huile, sont retrouvées dans différents extraits de feuilles de galba. On peut donc supposer, que ces extraits de feuilles pourraient améliorer la cicatrisation des plaies. L’utilisation de ces différents extraits de galba, aussi bien l’huile que les extraits de feuilles, sur la cicatrisation des plaies du pied diabétique représente une piste thérapeutique intéressante au vu de la prévalence du diabète et de cette complication en Guadeloupe.Au cours de cette thèse, une exploration d’une méthode de suivi de la cicatrisation sur un modèle 3D de peaux reconstruites a été réalisée. Puis, l’huile, la résine issue de l’huile et différents extraits de feuilles de galba en fonction du stade de maturité de celles-ci ont été évaluées pour leur propriétés antioxydantes, inhibitrices de la formation des produits terminaux de la glycation et inhibitrices de l’activité de différentes protéases impliquées dans le retard de cicatrisation ont été évaluées. Par exemple, la résine (100µg/mL) a une activité antioxydante mesurée selon la méthode DPPH à 7µg/mL équivalent trolox, inhibe la formation des produits terminaux de la glycation à 20% et inhibe l’activité de la MMP-9 à plus de 60% tandis que l’infusion éthanolique des jeunes feuilles de galba (JF-INF-EtOH) a une activité antioxydante mesurée selon la méthode DPPH à 20µg/mL équivalent trolox, inhibe la formation des produ! its terminaux de la glycation à 72% et inhibe l’activité de la MMP-9 à plus de 34%. Pour finir, une analyse comparative de l’activité des extraits de galba avec deux extraits chimiquement différents de Psidium guajava (goyave) et Punica granatum (grenade) a été faite. Les résultats obtenus permettent de mettre en lumière l’effet des polyphénols présents dans les extraits de galba, de goyave et de grenade. Ces différents extraits montrent donc un fort potentiel pour améliorer la cicatrisation diabétique.

Diabetic foot ulcers represent a global medical challenge: they are the cause of considerable morbidity. The healing defect found in diabetic patients is multifactorial: a dysfunction of the cells involved in healing, an increase in the activity of proteases, an increase in the formation of glycation end products which are responsible for numerous harmful effects. In addition, the increase in oxidative stress via the accumulation of reactive oxygen and nitrogen species also. The company Phytobôkaz has put in place all the technical procedures necessary for the commercialisation of Calophyllum calaba L. oil, or galba oil, known for its healing properties. However, we know that the active molecules present in the oil are found in different extracts of galba leaves. It can therefore be assumed that these leaf extracts could improve wound healing. The use of these different extracts of galba, both the oil and the leaf extracts, on the healing of diabetic foot wounds represents an interesting therapeutic avenue given the prevalence of diabetes and this complication in Guadeloupe.During this thesis, an exploration of a method for monitoring healing on a 3D model of reconstructed skin was carried out. Then, the oil, the resin from the oil and different extracts of galba leaves depending on the stage of maturity of these were evaluated for their antioxidant properties, inhibitory properties of the formation of end products of glycation and inhibitory of the activity of different proteases involved in delayed healing were evaluated. For example, the resin (100µg/mL) has an antioxidant activity measured according to the DPPH assay at 7µg/mL trolox equivalent, inhibits the formation of glycation end products by 20% and inhibits the activity of MMP-9 by more than 60%. % while the ethanolic infusion of young galba leaves (100µg/mL) has an antioxidant, activity measured according to the DPPH assay at 20µg/mL trolox equivalent, inhibits the formation of end products of glycation by 72% and inhibits the activity of MMP-9 at more than 34%. Finally, a comparative analysis of the activity of galba extracts with two chemically different extracts of Psidium guajava (guava) and Punica granatum (pomegranate) was made. The results obtained highlight the effect of polyphenols present in galba, guava and pomegranate extracts. These different extracts therefore show strong potential for improving diabetic healing.