Rôle des lipoprotéines et des protéines plasmatiques de transfert des lipides dans le métabolisme des lipopolysaccharides.

Role of lipoproteins and plasma lipid transfer proteins in lipopolysaccharide metabolism.

• Auteur / Autrice : Aloïs Dusuel
• Direction : Laurent Lagrost, Thomas Gautier
• Type : Projet de thèse
• Discipline(s) : Biochimie et biologie moléculaire
• Date : Inscription en doctorat le 03/10/2016
• Etablissement(s) : Bourgogne Franche-Comté
• Ecole(s) doctorale(s) : École doctorale Environnements, Santé (Dijon ; Besançon ; 2012-....)
• Partenaire(s) de recherche : Laboratoire : Centre de recherche Translationnelle en Médecine moléculaire (CTM) (Dijon)

Mots clés

Mots clés libres

Lipopolysaccharides

Lipoprotéines

Protéine de Transfert des Phopholipides

Protéine de Trasnfert des Esters de Cholestérol

Acide Uresodésoxycholique

Lipopolysaccharides

Lipoproteins

Phospholipid Transfer Protein

Cholesteryl Ester Transfer Protein

Ursodeoxycholic Acid

Résumé

Les lipoprotéines sont des complexes macromoléculaires assurant le transport des composés hydrophobes et amphiphiles, tels que les lipopolysaccharides (LPS), dans la circulation sanguine. Notre équipe étudie depuis plusieurs années la famille des protéines de transfert des lipides et de liaison des lipopolysaccharides (LT/LBP, notamment la protéine de transfert des esters de cholestérol – CETP, et la protéine de transfert des phospholipides – PLTP). Ces différents facteurs représentent des cibles ou des outils thérapeutiques prometteurs dans la prévention et le traitement des pathologies comportant une composante inflammatoire. Les objectifs de la thèse seront les suivants : - Suivre la détoxification des LPS dans des modèles animaux en combinant des méthodes d’analyse quantitative et de mesure de l’activité biologique des LPS. - Visualiser le transport des LPS chez la souris grâce à une technique de double marquage appliquée aux LPS et aux lipoprotéines. La distribution en temps réel des LPS doublement marqués sur animal entier sera effectuée par détection de la radioactivité en imagerie SPECT et la distribution tissulaire sera déterminée par microscopie en fluorescence sur coupes histologiques. - Utiliser des protéines LT/LBP humaines recombinantes afin de stimuler le processus de transport inverse des LPS. Les taux de survie, les niveaux de cytokines dans la circulation et le liquide péritonéal, la lipémie, la glycémie, la bactériémie, la capacité d’inactivation des LPS et leur excrétion biliaire seront comparés chez des souris ayant reçu ou non des protéines recombinantes.

Lipoproteins are macromolecular complexes which transport a number of hydrophobic and amphipathic compounds in the bloodstream, including lipopolysaccharides (LPS). Over the last years, our group has paid specific attention to plasma lipid transfer/lipopolysaccharide binding proteins (LT/LBP, in particular cholesteryl ester transfer protein - CETP, and phospholipid transfer protein - PLTP). They may constitute promising targets or tools in the prevention and treatment of human diseases with septic or sterile inflammation (including sepsis). Main goals of the PhD thesis will be: - to monitor LPS detoxification in animal models using a combination of quantitative lipopolysaccharide analysis and LPS biological activity measurement. - to image the LPS transport pathways using a dual-labelling method for LPS and lipoproteins. The real-time monitoring of LPS in mice will be achieved through detection of radioactivity by SPECT Scan as well as assessment of tissue distribution by fluorescence microscopy. Wild-type mice, PLTP-deficient mice, and human CETP transgenic mice will be studied under both control and inflammatory conditions. - to use recombinant LT/LBP proteins to activate the “reverse lipopolysaccharide transport - RLT” pathway. Survival rate, circulating and peritoneal fluid levels of proinflammatory cytokines, lipids, glycemia and bacteremia, as well as LPS neutralizing capacity and LPS biliary excretion will be compared in mice treated or not with recombinant proteins.