Modalités fines d'activation antigénique des LT Vγ9Vδ2 humains : mécanismes de détection du stress cellulaire et implication de la butyrophiline BTN3A/CD277

Antigenic activation modalities of human Vγ9Vδ2 T cells : BTN3A/CD277 butyrophilin implication in cellular stress detection mechanisms

• Auteur / Autrice : Cassie-Marie Peigné
• Direction : Emmanuel Scotet
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Biologie. Aspects moléculaires et cellulaires de la biologie. Immunologie
• Date : Soutenance en 2016
• Etablissement(s) : Nantes
• Ecole(s) doctorale(s) : École doctorale Biologie-Santé Nantes-Angers (2008-2021)
• Partenaire(s) de recherche : Laboratoire : Centre de Recherche en Cancérologie et Immunologie Intégrée Nantes Angers
• Partenaire(s) de recherche : autre partenaire : Nantes Université. Pôle SantéUFR Médecine et Techniques Médicales (Nantes) - Université Bretagne Loire (2016-2019)
• Jury : Examinateurs / Examinatrices : Bruno Martin, Richard Breathnach
• Jury : Rapporteurs / Rapporteuses : Daniel Olive, Virginie Lafont

Mots clés

Mots clés contrôlés

Activation des lymphocytes

Immunité

Antigènes

Glycoprotéines

Lymphocytes T

Résumé

Chez la plupart des primates adultes, les lymphocytes T (LT) γ9δ2, représentant la majorité des LTγδ périphériques, jouent un rôle important dans la protection de l'organisme (ex. Agents infectieux, tumeurs). Des molécules activant spécifiquement les LTγ9δ2 ont été caractérisées et sont majoritairement des composés non-peptidiques phosphorylés appelés phosphoantigènes (PAg). Les PAg naturels correspondent à des métabolites de voies de synthèse des isoprénoïdes proches aux cellules procaryotes et eucaryotes. Les modalités d'activation des LTγ9δ2 induite par les PAg demeurent mal connues. Des données obtenues dans l'équipe ont révélé le rôle clé joué par la glycoprotéine BTN3A (butyrophyline, CD277), et en particulier de l'isoforme BTN3A1, dans l'activation antigénique des LTγ9δ2 induite par les PAg. Mes travaux ont visé à étudier les mécanismes impliquant BTN3A lors de l'activation des LTγ9δ2. J'ai ainsi pu montrer que le domaine intracellulaire B30. 2 de BTN3A1 peut interagir avec les PAg, notamment grâce à l'histidine 351, constituant majeur et exclusif d'une poche chargée de ce domaine. En parallèle, j'ai mis en évidence l'implication d'autres protéines pouvant interagir avec ce domaine intracellulaire, par utilisation de la technique du double-hybride. Ces travaux ont révélé l'existence de six protéines candidates partenaires de BTN3A. Enfin, mes résultats ont permis de proposer une cartographie fonctionnelle de l'intégralité des isoformes de BTN3A. L'ensemble de mes travaux a permis d'apporter un éclairage nouveau sur les modalités fines d'activation antigénique des LTγ9δ2 induite par les PAg et de préciser le rôle clé joué par les molécules BTN3A dans ce processus.

Vγ9Vδ2 T cells are the major sub-population of γδ T cells in human blood. They play a leading part in protection of the organism against infectious agents and tumor cells. Vγ9Vδ2 T cells are specifically and strongly activated by small organic pyrophosphate molecules termed phosphoantigens (PAg) in a TCR dependant way. PAg are metabolites from the isoprenoid pathway shared by both procaryotes and eucaryotes. The activation modalities of Vγ9Vδ2 T cells by PAg remain to be defined in detail. Results from our team revealed an important role played by the BTN3 (CD277) molecule during Vγ9Vδ2 T cell antigenic activation. BTN3, and especially the BTN3A1 isoform, is involved in activating Vγ9Vδ2 T cells. The work described in this thesis, aimed at investigating the underlying mechnisms allowing BTN3 molecule to activate Vγ9Vδ2 T cells. We showed that the B30. 2 intracellular domain of BTN3A1 was able to fix PAg with a histidine residue in position 351 playing a vital role. Furthermore, we identified other proteins that could interact with this intracellular domain. We used the yeast double-hybrid technique, and identified six putative partner proteins. Finally, we carried out a function maping of the intracellular part of the various BTN3 isoforms. These results brought new insights into the antigenic activation modalities of Vγ9Vδ2 T cells by PAg and clarify the key role played by the BTN3 molecule in this process.