Depletion conditionnelle des cellules dendritiques chez des souris transgeniques exprimant la thymidine kinase du virus herpes simplex de type 1

Conditional ablation of dendritic cells in transgenic mice expressing the thymidine kinase of herpes simplex virus type 1

• Auteur / Autrice : Benoît Salomon
• Direction : David Klatzmann
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences biologiques et fondamentales appliquées. Psychologie
• Date : Soutenance en 1996
• Etablissement(s) : Paris 7

Résumé

Les cellules dendritiques (cd) sont des cellules presentatrices d'antigenes qui jouent un role majeur dans les reponses immunes t-dependantes. Pour mieux comprendre leur role physiologique, nous avons developpe un modele animal de depletion conditionnelle de ces cellules. La strategie est fondee sur l'expression selective dans les cd d'un transgene, la thymidine kinase du virus herpes simplex de type 1 (tk). En effet, nous montrons que tk, place sous le controle du promoteur du virus de l'immunodeficience humaine, est exprime preferentiellement dans les cd. L'expression de tk dans les cd en division leur confere une sensibilite au ganciclovir, faisant de la tk une toxine conditionnelle. Chez ces souris transgeniques ltr-tk, les males sont steriles par surexpression de tk dans les testicules. Le traitement par le ganciclovir entraine une depletion specifique des cd de la rate, mais aussi des troubles digestifs graves, probablement lies a une expression du transgene dans des cellules d'origine non hematopoietique. Parallelement nous avons developpe une autre lignee de souris transgenique ne presentant pas de trouble de la reproduction en utilisant une tk tronquee. Cependant, le traitement par le ganciclovir n'induit qu'une depletion partielle des cd. Puis, nous avons realise des souris chimeres par irradiation letale de souris non transgeniques, greffees avec de la moelle osseuse de souris ltr-tk. L'administration de ganciclovir a ces souris entraine une depletion des cd de la rate sans trouble pathologique apparent. Nous avons ensuite utilise ce modele pour deux applications. La possibilite de tuer les cd en division nous a permis d'evaluer la vitesse de renouvellement des cd in vivo dans differents tissus. Enfin, le role des cd dans les reponses immunes primaire et secondaire a ete analyse: nos resultats semblent montrer qu'en l'absence de cd, la reponse anticorps primaire aux globules rouges de mouton est abolie, alors que la reponse secondaire est partiellement conservee