Analyse in situ du cardiolopide de Saccharomyces cerevisiae à l'aide de la 10-N-nonyl acridine orange : changements topographiques du phospholipide dans la membrane interne mitochondriale de cellules réprimées et déréprimées

In situ analyse of saccharomyces cerevisiae cardiolipin using the 10-n-nonyl acridine orange. Topographic changes of the phospholipid into the inner mitochondrial membrane of repressed and derepressed cells

• Auteur / Autrice : Paul-François Gallet
• Direction : Raymond Julien
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Biochimie et biologie cellulaire
• Date : Soutenance en 1995
• Etablissement(s) : Limoges
• Partenaire(s) de recherche : autre partenaire : Université de Limoges. Faculté des sciences et techniques

Mots clés

Mots clés contrôlés

Chromatographie sur gel

Phospholipides

Mitochondries

Saccharomyces cerevisiae

Résumé

Dans ce travail, nous avons effectue l'analyse in situ du cardiolipide de levure grace a la 10-n-nonyl acridine orange. Le fluorochrome se lie a la mitochondrie via une interaction specifique avec le cardiolipide independante de l'activite metabolique de la cellule (repression ou derepression catabolique). La localisation et la composition en acides gras du phospholipide n'influencent pas la liaison du fluorochrome. Cette specificite de la molecule nous a permis: 1)- de mettre au point une technique spectrofluorimetrique de dosage du phospholipide grace a laquelle nous avons pu etablir que le contenu en cardiolipide des cellules reprimees est inferieur a celui de leurs homologues dereprimees, 2)- de determiner, par cytometrie en flux, l'asymetrie de distribution du phospholipide et de montrer qu'elle est tres prononcee lorsque les levures sont reprimees. Une biosynthese asymetrique du cardiolipide, induisant un bouleversement de sa topographie, est observee lors de la transition entre les deux phases de la diauxie. Le phospholipide est ensuite rapidement redistribue entre les deux feuillets de la membrane par un processus non encore elucide. L'inhibition de la synthese proteique nucleocytoplasmique ou mitochondriale limite la synthese et la redistribution du cardiolipide. L'utilisation de souches mutees au niveau nucleaire ou au niveau mitochondrial n'apporte pas de reponse claire sur le mecanisme qui regle le contenu et l'asymetrie du cardiolipide dans la membrane interne mitochondriale