La rhinοpneumοnie équine : caractérisatiοn mοléculaire et cellulaire de l'herpèsvirus équin 4, un mοdèle d'étude pοur l'appοrt de cοnnaissances dans la pathοgénie de la maladie, la survie et l'intégrité du virus ainsi que l'identificatiοn de mοlécules antivirales

Equine rhinopneumonitis : molecular et cellular characterisation of equine herpesvirus 4, a study model for improving insight into the pathogenesis of the disease, the survival and integrity of the virus, and the identification of antiviral compounds

• Auteur / Autrice : Camille Normand
• Direction : Stéphane Pronost
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Aspects moleculaires et cellulaires de la biologie
• Date : Soutenance le 20/06/2024
• Etablissement(s) : Normandie
• Ecole(s) doctorale(s) : École doctorale Normande de biologie intégrative, santé, environnement (Mont-Saint-Aignan, Seine-Maritime)
• Partenaire(s) de recherche : Laboratoire : Biologie, Génétique et Thérapies Ostéo-Articulaires et Respiratoires
• Partenaire(s) de recherche : Établissement co-accrédité : Université de Caen Normandie (1971-....)
• Jury : Président / Présidente : Alain Rincé
• Jury : Examinateurs / Examinatrices : Alain Rincé, Pierre-Emmanuel Ceccaldi, Sandra Martin-Latil, Érika Hue, Évelyne Manet
• Jury : Rapporteurs / Rapporteuses : Pierre-Emmanuel Ceccaldi, Sandra Martin-Latil

Mots clés

Mots clés contrôlés

Biologie moléculaire

Antiviraux

Étiologie

Herpèsvirus équin 4

Équidés

Mots clés libres

Séroneutralisation

Equine rhinopneumonitis

Equid herpesvirus 4

Pathogenesis

Integrity-PCR

Real-time cell analysis

Antiviral

Infectious risk

Résumé

Jusqu’en 1981, l’herpèsvirus équin 4 (HVE-4) et l’HVE-1, responsables de la rhinopneumonie, étaient considérés comme deux sous-types d’un même virus. Il a depuis été démontré que l’HVE-4 était très peu impliqué dans les avortements et son implication dans la forme nerveuse de la maladie n’est pas démontrée à ce jour. C’est probablement la raison qui fait que ce virus est moins étudié que l’HVE-1. Ce travail de thèse a porté sur trois aspects importants de la rhinopneumonie chez le cheval afin d’apporter de la connaissance sur l’HVE-4 et d’évaluer l’intérêt d’utiliser ce virus comme modèle. Nous avons pu démontrer en comparant deux épizooties dans deux haras au profil vaccinal différents et en mesurant l’excrétion d’HVE-4 et la virémie par qPCR, l’apparition de séroconversions, l’intérêt de la vaccination. Si la contamination se fait essentiellement par contact, l’impact de la survie du virus dans l’environnement doit être étudiée. Nous avons montré que l’HVE-4 pouvait survivre au moins 28 jours à 4°C dans l’eau mais également sur différentes surfaces. Nous avons aussi développé une méthode d’integrity-PCR pour différencier les virus infectieux des virus non infectieux. Enfin, nous avons criblé un nombre de molécules importants par RTCA et démontré l’efficacité de plusieurs d’entre elles dont la décitabine pour laquelle nous avons réalisé une étude préliminaire du mode d’action par une analyse transcriptomique.

Until 1981, equine herpesvirus 4 (EHV-4) and EHV-1, which cause rhinopneumonitis, were considered to be two subtypes of the same virus. Since then, it has been shown that EHV-4 is only marginally involved in abortions, and its involvement in the nervous form of the disease has not yet been demonstrated. This is probably why this virus is less studied than HVE-1. This thesis focused on three important aspects of rhinopneumonitis in horses in order to gain a better understanding of EHV 4 and to assess the value of using this virus as a model. By comparing two epizootics at two stud farms with different vaccination profiles and measuring EHV-4 excretion and viremia by qPCR, we were able to demonstrate the benefits of vaccination and the appearance of seroconversions. Although contamination occurs mainly through contact, the impact of the virus's survival in the environment needs to be studied. We have shown that EHV-4 can survive for at least 28 days at 4 °C in water and on various surfaces. We have also developed an integrity-PCR method to differentiate between infectious and non-infectious viruses. Finally, we have screened a number of compounds using RTCA and demonstrated the efficacy of several of them, including decitabine, for which we have carried out a preliminary study of the mode of action using transcriptomic analysis.