Identification et caractérisation des facteurs cellulaires gouvernant l’entrée du virus de la Fièvre Hémorragique de Crimée-Congo

Identification and characterisation of host factors governing Crimean-Congo Hemorrhagic Fever Virus entry

• Auteur / Autrice : Maureen Ritter
• Direction : François-Loïc Cosset, Chloé Journo
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences de la vie et de la santé
• Date : Soutenance le 27/09/2024
• Etablissement(s) : Lyon, École normale supérieure
• Ecole(s) doctorale(s) : École doctorale de Biologie Moléculaire Intégrative et Cellulaire (Lyon ; 1999-....)
• Partenaire(s) de recherche : Laboratoire : Centre International de Recherche en Infectiologie (Lyon ; 2013-....)
• Jury : Président / Présidente : Pierre-Yves Lozach
• Jury : Examinateurs / Examinatrices : Chloé Journo, Pierre-Yves Lozach, Aurélie Albertini, Jean-Luc Battini
• Jury : Rapporteur / Rapporteuse : Aurélie Albertini, Jean-Luc Battini

Mots clés

Mots clés contrôlés

Virus de la fièvre hémorragique de Crimée-Congo

Mots clés libres

VFHCC

Virus

Entrée

Récepteur

LDL-R

Apolipoprotéine

CCHFV

Virus

Entry

Receptor

LDL-R

Apolipoprotein

Résumé

Le virus de la fièvre hémorragique de Crimée-Congo (FHCC) est un pathogène émergent mortel appartenant au genre des Orthonairovirus. Le virus est transmis par les tiques et a un large tropisme, infectant l'homme, le bétail, ou les oiseaux. Jusqu'à récemment, le récepteur d'entrée du CCHFV n'était pas identifié. Dans ce contexte et en utilisant des particules virales compétentes pour la transcription et l'entrée (tecVLPs), j'ai évalué le rôle de du récepteur des lipoprotéines de faible densité (LDL-R), et déterminé qu’il jouait un rôle dans l'infection par le FHCC. Le LDL-R est un récepteur de transfert de lipides qui permet l'absorption du cholestérol en circulation. Cette internalisation est médiée par les apolipoprotéines E et B (apoE et apoB), présentes sur le cholestérol, et qui se lient aux récepteurs. En utilisant des anticorps, des protéines solubles et des knock-down, j'ai pu déterminer que LDL-R favorise l'infection par le FHCC. Ensuite, j'ai montré que le LDL-R était plus précisément un facteur de d’attachement et d'internalisation en cellules humaines. Ensuite, j'ai pu déterminer que l'apoE est présente sur le virion et favorise la liaison au récepteur, donc l'entrée du virus. Enfin, grâce à une collaboration, j'ai pu confirmer mes résultats en utilisant le virus sauvage. En résumé, j'ai découvert un facteur permettant l’attachement et l'internalisation du FHCC dans les cellules humaines. De plus, j'ai caractérisé que l'interaction virus-récepteur peut se faire par l'intermédiaire d’apoE incorporées dans les particules.

Crimean-Congo haemorrhagic fever virus (CCHFV) is a deadly emerging pathogen belonging to the Orthonairovirus genus. The virus is transmitted by ticks and has a wide tropism, infecting humans, cattle and birds. Until recently, the CCHFV entry receptor had not been identified. In this context and using transcription- and entry-competent viral particles (tecVLPs), I assessed the role of the low-density lipoprotein receptor (LDL-R), and determined that it played a role in CCHF infection. LDL-R is a lipid transfer receptor that allows the uptake of circulating cholesterol. This internalisation is mediated by apolipoproteins E and B (apoE and apoB), present on cholesterol, which bind to the receptors. Using antibodies, soluble proteins and knockdowns, I was able to determine that LDL-R promotes infection by CCHF. It hen showed that LDL-R was more precisely a factor in attachment and internalisation in human cells. Next, I was able to determine that apoE is present on the virion and promotes binding to the receptor, and hence viral entry. Finally, thanks to a collaboration, I was able to confirm my results using the wild-type virus. In summary, I discovered a factor that enables CCHF to attach to and internalise in human cells. In addition, I characterised that virus-receptor interaction can take place via apoE incorporated into the particles.