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Thèse soutenue

Impact de l'acide eicosapentaénoïque (EPA), acide gras polyinsaturé n-3, sur l'efflux du cholestérol ABCA1-dépendant des macrophages humains

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Auteur / Autrice : Ludovic Dakroub
Direction : Natalie Fournier
Type : Thèse de doctorat
Discipline(s) : Physiologie et physiopathologie
Date : Soutenance le 15/03/2023
Etablissement(s) : université Paris-Saclay
Ecole(s) doctorale(s) : École doctorale Innovation thérapeutique : du fondamental à l'appliqué (Châtenay-Malabry, Hauts-de-Seine ; 2015-....)
Partenaire(s) de recherche : Laboratoire : Lipides : systèmes analytiques et biologiques (Châtenay-Malabry, Hauts-de-Seine ; 2015-....)
Référent : Université Paris-Saclay. Faculté de pharmacie (Orsay, Essonne ; 2020-....)
graduate school : Université Paris-Saclay. Graduate School Life Sciences and Health (2020-….)
Jury : Président / Présidente : Maryse Guérin
Examinateurs / Examinatrices : Dominique Bonnefont-Rousselot, Christophe Lamaze, Wilfried Le Goff, Delphine Rousseau-Ralliard
Rapporteurs / Rapporteuses : Dominique Bonnefont-Rousselot, Christophe Lamaze

Résumé

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Des apports élevés en acides gras polyinsaturés (AGPI), en particulier en acide eicosapentaénoïque (EPA) (C20:5 n-3), sont associés à des bienfaits pour la santé cardio-vasculaire. Les acides gras polyinsaturés alimentaires sont incorporés dans les phospholipides membranaires, ce qui peut altérer la fonction des protéines membranaires. Nous avons étudié l'effet de l'incorporation de plusieurs AGPI dans la membrane des macrophages de la lignée humaine THP-1 sur la principale voie d'efflux du cholestérol anti-athérogène médiée par l'ABCA1.Les travaux de cette thèse se décomposent en deux parties. Dans un premier temps nous avons travaillé sur des macrophages non surchargés en cholestérol représentant des stades précoces de l'athérosclérose. La deuxième partie est consacrée à étudier le modèle surchargé en cholestérol représentant ainsi des stades plus avancés de l'athérosclérose.L'objectif de la première partie de mon travail était d'étudier l'effet de l'incorporation membranaire de plusieurs AGPI (en particulier l'EPA) sur la voie d'efflux du cholestérol médiée par l'ABCA1 à l'aide d'un modèle de macrophages à contenu normal en cholestérol intracellulaire. Nos résultats ont montré que l'incorporation d'EPA dans les membranes des macrophages THP-1 augmentait l'efflux de cholestérol dépendant de l'ABCA1. L'augmentation de la fonctionnalité de l'ABCA1 n'est pas due à des changements dans l'expression ou la localisation du transporteur ni à une modification du phénotype des macrophages. La stimulation de la fonction ABCA1 est liée à une augmentation de son activité ATPase via un mécanisme dépendant de la PKA. Par ailleurs, la production d'eicosanoïdes n'est pas impliquée dans cette stimulation de l'efflux de cholestérol qui s'accompagne d'une liaison accrue de l'apo AI aux macrophages.L'objectif de la deuxième partie de ma thèse était d'étudier l'effet de l'incorporation membranaire de plusieurs AGPI, en particulier l'EPA, sur l'efflux de cholestérol à partir de macrophages THP-1 surchargés en cholestérol. Dans des conditions expérimentales similaires, l'EPA a produit l'effet inverse de celui observé avec les THP-1 non surchargés en cholestérol, réduisant cette fois l'efflux ABCA1 des macrophages spumeux. Cette réduction de la fonction ABCA1 est modeste avec une réduction moyenne de l'efflux de 12 %. Ces résultats sont concordants avec une baisse d'efflux massique du cholestérol de 16 %. De plus, cet effet s'accompagne d'une réduction significative (-19%) de l'efflux médié par les HDL, un processus impliquant à la fois les voies SR-BI et ABCA1. Nous émettons l'hypothèse que l'EPA pourrait réguler l'efflux de cholestérol libre en modulant l'hydrolyse des esters de cholestérol des gouttelettes lipidiques par l'hydrolase neutre des esters de cholestérol (nCEH).