Développement de tests rapides pour la détection des béta-lactamases

Development of rapid tests for beta-lactamases detection

• Auteur / Autrice : Christian Moguet
• Direction : Hervé Volland
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Microbiologie
• Date : Soutenance le 02/02/2023
• Etablissement(s) : université Paris-Saclay
• Ecole(s) doctorale(s) : École doctorale Innovation thérapeutique : du fondamental à l'appliqué
• Partenaire(s) de recherche : Laboratoire : Médicaments et technologies pour la santé (Gif-sur-Yvette, Essonne ; 2020-....)
• Partenaire(s) de recherche : référent : Université Paris-Saclay. Faculté de pharmacie (Orsay, Essonne ; 2020-....)
• Partenaire(s) de recherche : graduate school : Université Paris-Saclay. Graduate School Santé et médicament (2020-....)
• Jury : Président / Présidente : Claire Janoir
• Jury : Examinateurs / Examinatrices : Vincent Cattoir-Jonville, Pierre Bogaerts, Nicole Orange
• Jury : Rapporteurs / Rapporteuses : Vincent Cattoir-Jonville, Pierre Bogaerts

Mots clés

Mots clés contrôlés

Bêta-lactamines

β-lactamases

Résistance aux antibiotiques

Mots clés libres

Détection

Antibiorésistance

Test immunochromatographique

Detection

Antimicrobial resistance

Lateral flow immunoassay

Résumé

La lutte contre les bactéries multi-résistantes aux antibiotiques (BMR) représente un des plus grands défis auxquels doivent faire face nos sociétés actuelles. Le nombre d'infections causées par des BMR étant en nette augmentation dans le monde entier, celles-ci représentent un enjeu crucial de santé publique. L'un des principaux mécanismes de résistance mis en place par les bactéries est la production de béta-lactamases, enzymes hydrolysant les antibiotiques de type béta-lactamine. Pour lutter efficacement contre la dissémination de bactéries produisant ces enzymes et fournir un traitement approprié aux patients il est essentiel de pouvoir détecter rapidement les béta-lactamases.Dans ce contexte, le projet de cette thèse est de développer deux nouveaux tests bandelettes permettant de détecter l'activité enzymatique de ces enzymes. Ils détecteront l'hydrolyse de deux classes de béta-lactamines : les céphalosporines et les carbapénèmes.Ces tests seront basés sur l'utilisation d'anticorps monoclonaux spécifiques de ces deux classes d'antibiotiques. Ces travaux de thèse impliqueront la production, la sélection et la caractérisation de ces anticorps. Les tests développés seront transférés à un industriel et validés avec différentes souches bactériennes produisant différentes béta-lactamases dans différents milieux biologiques (hémocultures, urines, écouvillons rectaux).

The fight against multi-antibiotic resistant bacteria (MDR) is one of the greatest challenges facing our current societies. As the number of infections caused by MDRs is increasing significantly worldwide, they represent a crucial public health issue.One of the main resistance mechanisms developed by bacteria is the production of beta-lactamases, enzymes that hydrolyze beta-lactam antibiotics. To effectively control the spread of bacteria producing these enzymes and provide appropriate treatment to patients, it is essential to be able to detect beta-lactamases as soon as possible. In this context, the project of this thesis is to develop two new strip tests to detect the enzymatic activity of these enzymes. They will detect the hydrolysis of two classes of beta-lactamines: cephalosporins and carbapenems. These tests will be based on the use of monoclonal antibodies specific to these two classes of antibiotics. This thesis work will involve the production, selection and characterization of these antibodies. The tests developed will be transferred to a company and validated with different bacterial strains producing various beta-lactamases in different biological media (blood cultures, urine, rectal swabs).