Etude des effets protecteurs de substances naturelles issues du cactus sur le stress oxydant et l'inflammation liés à l'absence de la β-oxydation peroxysomale
Auteur / Autrice : | Mounia Tahri Joutey |
Direction : | Mustapha Cherkaoui-Malki, Boubker Nasser |
Type : | Thèse de doctorat |
Discipline(s) : | Médecine, biochimie, biologie cellulaire et moléculaire, physiologie et nutrition |
Date : | Soutenance le 21/02/2023 |
Etablissement(s) : | Bourgogne Franche-Comté en cotutelle avec Université Hassan Ier (Settat, Maroc) |
Ecole(s) doctorale(s) : | École doctorale Environnements, Santé (Dijon ; Besançon ; 2012-....) |
Partenaire(s) de recherche : | Laboratoire : Biochimie du péroxysome, inflammation et métabolisme lipidique (Bio-peroxIL) (Dijon) |
Etablissement de préparation : Université de Bourgogne (1970-....) | |
Jury : | Président / Présidente : Abdallah Bagri |
Examinateurs / Examinatrices : Pierre Andreoletti, Soumaya Cherif Idrissi EL Ganouni | |
Rapporteurs / Rapporteuses : Hamid Morjani, Halima Lebrazi |
Mots clés
Mots clés contrôlés
Résumé
L’objectif de mes travaux de thèse était de mieux comprendre le rôle des cellules microgliales dans la neuroinflammation initiée dans plusieurs leucodystrophies peroxysomales neurovégétatives et d’explorer les effets protecteurs de substances issues du cactus Opuntia ficus indica. Pour ce faire, nous avons utilisé comme modèle in vitro des cellules microgliales déficientes en transporteurs ATP Binding Cassette D (ABCD1 et ABCD2) ou en acyl-CoA oxydase 1 (ACOX1). Il s’agit de deux lignées cellulaires murines BV-2, déficiente en Abcd1/Abcd2 - /- ou déficiente en Acox1-/-, obtenues par ailleurs par édition génique grâce à la méthodologie CRISPR/Cas9. Nos résultats ont permis : (i) de caractériser, par analyse en centrifugation différentielle et ultracentrifugation isopycnique, l’impact de ces déficiences (Acox1 -/- ou Abcd1/d2-/-) sur la taille et /ou la densité des peroxysomes et les autres organites cellulaires grâce aux activités des enzymes marqueurs. De plus, nous avons démontré une modification de la capacité phagocytaire de ces cellules microgliales mutantes ; (ii) d’explorer l’effet protecteur de l’huile de graines de cactus (CSO), Opuntia ficus-indica, in vivo chez les souris, traitées ou non par des lipopolysaccharides (LPS), montrant ainsi une activité anti-inflammatoire de la CSO en réduisant aussi bien au niveau cérébrale l’expression d’iNos qu’au niveau hépatique les expressions de l’Il- 1β et l’Il-6. La CSO est capable également de rétablir les activités peroxysomales respectivement, antioxydante de la catalase et -oxydative de l’ACOX1 affectées par le traitement aux LPS ; (iii) d’évaluer, dans les cellules sauvages et déficientes en Acox1, le potentiel protecteur de deux familles de substances issues de cactus (flavanols :isorhamnétine, isorhamnétine-rutinoside, quercétine ; et polyphénols : férulaldéhyde, syringaldéhyde, vanilline) contre l’inflammation et le stress oxydatif générés par l’absence de l’activité ACOX1 et/ou par les LPS. Ces substances issues de cactus sont capables de réduire l’expression des médiateurs pro-inflammatoires (TNFα, NLRP3, IL-1β) et la production de NO, d’augmenter l’expression des enzymes antioxydantes peroxysomales (Catalase et SOD1), et de restaurer les fonctions lysosomales impactées par le stress cellulaire induit par l’absence de l’activité ACOX1 ou par le traitement aux LPS.