Vectorisation d'anticorps anti-TRAIL-R1 sur des nano-bâtonnets d'or

Enhancement of therapeutic antibodies anti-TRAIL-R1 using gold nanorods

• Auteur / Autrice : Abdelmnim Radoua
• Direction : Olivier Micheau
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Biochimie et biologie moléculaire
• Date : Soutenance le 21/12/2023
• Etablissement(s) : Bourgogne Franche-Comté
• Ecole(s) doctorale(s) : École doctorale Environnements, Santé (Dijon ; Besançon ; 2012-....)
• Partenaire(s) de recherche : Laboratoire : Centre de recherche Translationnelle en Médecine moléculaire (CTM) (Dijon)
• Partenaire(s) de recherche : établissement de préparation : Université de Bourgogne (1970-2024)
• Jury : Président / Présidente : Nadine Millot
• Jury : Examinateurs / Examinatrices : Olivier Micheau, Sylvie Fournel, Miryana Hemadi, Alain Wagner
• Jury : Rapporteurs / Rapporteuses : Sylvie Fournel, Miryana Hemadi

Mots clés

Mots clés contrôlés

Ligand TRAIL

Récepteurs aux facteurs de nécrose tumorale

Apoptose

Protocoles antinéoplasiques

Apoptose

Cancer -- Thérapeutique

Nanoparticules d'or

Mots clés libres

Anticorps

Hyperthermie

Nanoparticules

Valorisation

Valorization

Antibodies

Hyperthermia

Nanoparticules

Résumé

Dans cette étude, nous avons recherché la méthode optimale pour conjuguer des nanobâtonnets d'or (GNRs) avec des agonistes de récepteurs pro-apoptotiques (PARAs), des anticorps ou des ligands contenant des fragments Fc de la superfamille du facteur de nécrose tumorale (TNF) afin de créer un agent anti-tumoral sélectif. Les GNRs ont été synthétisés et fonctionnalisés en utilisant des méthodes telles que EDC/NHS, la condensation d’aldéhyde-amine primaire suivie par la réduction de la base de Schiff formé ou la conjugaison orientée par click médiée par DBCO. Une première étape a impliqué le greffage de lien avec PEG10K pour la mono-dispersion des GNRs et la chimie appropriée avant le couplage des PARAs. Ces GNRs, caractérisés par spectroscopie UV-visible, XPS et TEM, ont ensuite été conjugués avec des PARAs et testés sur la lignée cellulaire de cancer du sein MDA-MB-231. Alors que EDC/NHS était efficace pour conjuguer des ligands Fc ou l'anticorps anti-DR4 aux GNRs, le potentiel pro-apoptotique était le mieux conservé avec la méthode de chimie click. Plus précisément, l'approche de chimie click orientée a amplifié le potentiel pro-apoptotique de l'anticorps anti-DR4. Ceci suggère que le greffage orienté basé sur la chimie click de l'anticorps anti-DR4 sur les GNRs non seulement maintient son immunoréactivité mais augmente également ses capacités pro-apoptotiques, offrant de nouvelles voies thérapeutiques.

In this study, we sought the optimal method to conjugate gold nanorods (GNRs) with pro-apoptotic receptor activators (PARAs), antibodies, or Fc-containing ligands from the tumor necrosis factor (TNF) superfamily to create a selective anti-tumor drug. GNRs were synthesized and functionalized using methods like EDC/NHS, aldehyde- primary amine condensation followed by Schiff base- reduction , or DBCO-mediated click-oriented conjugation. An initial step involved linker grafting with PEG10K for GNR mono-dispersion and proper chemistry before PARAs coupling. These GNRs,characterized using UV-visible spectroscopy, XPS, and TEM, were then conjugated with PARAs and tested on the MDA-MB-231 breast cancer cell line. While EDC/NHS was effective in conjugating Fc-ligands or the anti-DR4 antibody to GNRs, the pro-apoptotic potential was best retained with the click-chemistry method. Specifically, the oriented click-chemistry approach amplified the pro-apoptotic potential of the anti-DR4 antibody. This suggests that the click chemistry-based oriented grafting of the anti-DR4 antibody on GNRs not only maintains its immunoreactivity but also boosts its pro-apoptotic capabilities, offering new therapeutic avenues.