Études structurales des complexes d'élongation de l'ARN polymérase et de leur interaction avec des machineries cellulaires
Auteur / Autrice : | Vita Vidmar |
Direction : | Albert Weixlbaumer |
Type : | Thèse de doctorat |
Discipline(s) : | Sciences de la vie et de la santé |
Date : | Soutenance le 07/02/2023 |
Etablissement(s) : | Strasbourg |
Ecole(s) doctorale(s) : | École doctorale des Sciences de la vie et de la santé (Strasbourg ; 2000-....) |
Partenaire(s) de recherche : | Laboratoire : Institut de génétique et de biologie moléculaire et cellulaire (Strasbourg) |
Jury : | Président / Présidente : Gilles Charvin |
Rapporteurs / Rapporteuses : Marc Nadal, Maria Selmer |
Mots clés
Résumé
Afin de surmonter les effets inhibiteurs d'un enroulement excessif du brin d'ADN dû à la transcription, l'ARN polymérase (ARNP) collabore avec les ADN topoisomérases. Des interactions directes entre la RNAP et la topoisomérase I (TopoI) avaient été suggérées sans que les détails moléculaires de leur interaction soient déterminés. Dans cette étude, nous avons examiné la coopération entre la RNAP d'E. coli et la TopoI in vitro en utilisant la biochimie et la cryo-EM. Nous avons résolu les structures des complexes ARNP-TopoI dans plusieurs états fonctionnels. Le surenroulement de l'ADN matriciel affecte également la pause transcriptionnelle, et nous avons démontré que la durée de la pause augmente avec l'accroissement de la superhélicité négative. Pour explorer ce mécanisme, nous avons mis en place une méthode permettant d'étudier les complexes d'élongation de la RNAP par cryo-EM sur des ADN avec une topologie proche du surenroulement physiologique.