Caractérisation du système de réparation des mésappariements de l'ADN ou « mismatch repair » dans les tumeurs sébacées et analyse de leur microenvironnement inflammatoire

Characterization of the DNA mismatch repair phenotype in sebaceous tumors and analysis of their inflammatory microenvironment

• Auteur / Autrice : Éric Frouin
• Direction : Jean-Claude Lecron, Laure Favot-Laforge
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Aspects moléculaires et cellulaires de la Biologie
• Date : Soutenance le 16/03/2023
• Etablissement(s) : Poitiers
• Ecole(s) doctorale(s) : École doctorale Rosalind Franklin (Poitiers ; 2022-....)
• Partenaire(s) de recherche : Laboratoire : LITEC
• Partenaire(s) de recherche : faculte : Université de Poitiers. UFR de médecine et de pharmacie
• Jury : Président / Présidente : Lucie Karayan-Tapon
• Jury : Examinateurs / Examinatrices : Vincent Lagente
• Jury : Rapporteur / Rapporteuse : Lise Boussemart, Marie-Odile Jauberteau-Marchan

Mots clés

Mots clés contrôlés

Tumeurs sébacées

Dépistage

Micro-environnement tumoral

Syndrome de Muir-Torre

Mots clés libres

Adénome sébacé

Sébacéome

Carcinome sébacé

Macrophage

Cellule dendritique

Pd-L1

Muir-Torre

Instabilité des microsatellites

Sebaceous adenoma

Sebaceoma

Sebaceous carcinoma

Macrophage

Dendritic cell

Pd-L1

Muir-Torre syndrome

Microsatellite instability

Résumé

Les tumeurs sébacées (TSs) sont des tumeurs cutanées rares, à la fois bénignes (adénomes sébacés ou ASs et sébacéomes ou Ss) et malignes (carcinomes sébacés ou CSs). Une proportion importante survient dans le cadre d’un syndrome de Muir-Torre-Syndrome de Lynch (SMT-SL). Ce syndrome peut être dépisté par immunohistochimie (IHC) et par biologie moléculaire (BM) qui permettront la détermination d’un phénotype « mismatch repair déficient » (dMMR) et par un score clinique de risque de la Mayo-Clinic, pour déterminer quels patients doivent avoir un génotypage. La présence d’un phénotype dMMR ne signifie pas que la tumeur est d’origine germinale, de nombreuses TSs étant sporadiques. Le phénotype dMMR est fréquent (70,7%), et une excellente concordance entre IHC et BM (coefficient Kappa de Cohen à 0,85) suggère que les 2 techniques sont équivalentes pour le dépistage du phénotype dMMR, avec 7,1% de discordances. Dans 20,3% de cas, la BM donne des résultats « sous réserve » ou pas de résultats, alors que l’IHC est toujours contributive, suggérant que l’IHC est supérieure à la BM. Parmi les 13 patients atteints de SMT-SL, 2 ont un faible score de risque de la Mayo-Clinic (1 point) et n’auraient pas été dépistés par ce score. Ainsi, l’IHC a la sensibilité la plus élevée pour le dépistage du SMT-SL (100%) avec une faible spécificité, tandis qu’un score de risque de la Mayo-Clinic >2 points a une sensibilité plus faible (92%) mais une spécificité plus élevée (89%). Par ailleurs, peu d‘études sont consacrées à l’analyse du microenvironnement immun des TSs, sinon sur l’expression de marqueurs de régulation de la réponse immune (PD-1, PD-L1) et jamais au lien entre la composition de ce microenvironnement et le statut MMR. Nous avons analysé la composition de ces infiltrats en comparant les zones (massifs tumoraux, stroma intra-tumoral et tissu conjonctif péri-tumoral) avec le type histologique, reflet de l’agressivité des TSs, puis selon le statut MMR (type de protéine(s) absente(s), existence ou non d’un SMT). Nous montrons que les infiltrats immuns (Lymphocytes T CD3, Lymphocytes T cytotoxiques CD8, Lymphocytes T helpers CD4, Lymphocytes Treg FOXP3, Lymphocytes B CD20, Macrophages CD68, Macrophages de type M1 INOS, Macrophages de type M2 CD163, Cellules dendritiques CD11c), comme l’expression des molécules PD-1 et PD-L1, sont plus importants dans le stroma intra-tumoral que dans les massifs tumoraux et le tissu conjonctif péri-tumoral. Les CSs ont un infiltrat immunitaire plus dense en macrophages M2 et en DCs que les tumeurs bénignes, notamment les ASs. Dans le microenvironnement des CSs, l’expression de PD-L1 est plus importante que dans le microenvironnement des tumeurs bénignes, sans expression significative par les cellules tumorales. De plus, aucune différence dans la composition du microenvironnement des TSs a été observée selon le statut MMR, l’existence d’un SMT-SL, ou le type de protéine(s) absente(s). Pour dépister le SMT-SL, la réalisation d’un score de risque Mayo-clinique en première intention puis de l’IHC semble la meilleure stratégie avec un coût inférieur pour la société. Cette attitude doit être adaptée aux ressources médico-économiques de chaque pays. Nos données montrent aussi que la composition du microenvironnement des TSs n’est pas liée au phénotype MMR mais à l’agressivité des lésions. Au sein de ce microenvironnement, nous suggérons que les macrophages, notamment de type M2, et les DCs jouent un rôle permissif à la croissance tumorale. L’immunothérapie ciblant la liaison PD-1/PD-L1 pourrait être une bonne option thérapeutique pour les CSs.

Sebaceous neoplasms (SNs) are rare skin tumors, both benign (sebaceous adenomas or SAs and sebaceomas or Ss) and malignant (sebaceous carcinomas or SCs). A significant proportion occurs as part of the Muir-Torre syndrome-Lynch syndrome (MTS-LS). This syndrome is detected by immunohistochemistry (IHC), and, or molecular biology (MB) which will allow the determination of a deficient mismatch repair phenotype (dMMR), and, or by the clinical risk score of Mayo-Clinic (to determine which patients should have genotyping). The presence of a dMMR phenotype does not mean that the tumor is germline, as many SNs are sporadic. The dMMR phenotype is frequent (70.7%), and the agreement between IHC and MB (Cohen's Kappa coefficient at 0.85) suggests that both techniques are equivalent for screening the dMMR phenotype, with 7.1% discrepancies. In 20.3% of cases, the MB is not informative while IHC is always contributory, suggesting that the IHC is more contributive than the MB. Of the 13 patients with MTS-LS, 2 have a low Mayo-Clinic risk score (1 point) and would not have been screened by this score. IHC has the highest sensitivity for screening for MTS-LS (100%) with low specificity, while the Mayo-Clinic risk score >2 points has lower sensitivity (92%) but higher specificity (89%). Otherwise, few studies are devoted to the analysis of the immune microenvironment of SNs, except a PD-1, PD-L1 expression, and never on the link between the composition of this microenvironment and the MMR status. We analyzed the nature of these infiltrates by comparing the areas (tumor nests, intratumoral stroma and peritumoral connective tissue) with the histological subtypes, reflecting the aggressiveness of SNs, then according to the MMR status (type of protein (s) absent (s), existence or not of a MTS-LS). We show that immune infiltrates (CD3 T cells, CD8 Cytotoxic T cells, CD4 T helper cells, FOXP3 Treg, CD20 B lymphocytes, CD68 macrophages, INOS M1 macrophages, CD163 M2 macrophages, CD11c dendritic cells), and PD-1 and PD-L1 proteins expression are more important in the intratumoral stroma compared to tumor nests and peritumoral connective tissue. SCs have more M2 macrophages infiltration and DCs than benign SNs, especially SAs. In the SC’s microenvironment, PD-L1 expression is higher than in the benign SNs microenvironment, with no expression by tumor cells. In addition, no differences in the composition of the SNs microenvironment were observed linked to the MMR status, the existence of a MTS-LS, or to the type of protein(s) absent. Taken together, to detect MTS in SNs patients, first line Mayo-Clinic-risk-score followed by IHC seems the most accurate strategy with lower cost for society. This attitude should be adapted to the medico-economic resources of each country. Our data also show that the composition of the microenvironment of SNs is not related to the MMR status but to the aggressiveness of the lesions. Within this microenvironment, we suggest that M2 macrophages and DCs play a preponderant permissive role to tumor growth. Immunotherapy targeting PD-1/PD-L1 binding may be a good treatment option for SCs.