Impact de la biopsie liquide dans le mélanome uvéal primitif et métastatique
Auteur / Autrice : | Arnaud Martel |
Direction : | Paul Hofman, Sandra Musso-Lassalle |
Type : | Thèse de doctorat |
Discipline(s) : | Recherches cliniques et thérapeutiques |
Date : | Soutenance le 22/12/2023 |
Etablissement(s) : | Université Côte d'Azur |
Ecole(s) doctorale(s) : | École doctorale Sciences de la vie et de la santé (Nice ; 1992-....) |
Partenaire(s) de recherche : | Laboratoire : Institut de recherche sur le cancer et le vieillissement (Nice) |
établissement de préparation : Université Côte d’Azur (2020-....) | |
Jury : | Président / Présidente : Stéphanie Baillif-Gostoli |
Examinateurs / Examinatrices : Stéphanie Baillif-Gostoli, Pierre-Yves Robert, Laurent Kodjikian, Frédéric Mouriaux | |
Rapporteurs / Rapporteuses : Pierre-Yves Robert, Laurent Kodjikian |
Mots clés
Mots clés contrôlés
Résumé
Le mélanome uvéal (MU) est le cancer intraoculaire primitif le plus fréquent chez l'adulte. Malgré une prise en charge médico-chirurgicale adaptée permettant un contrôle local de la tumeur dans plus de 90% des cas, on estime qu'environ 50% des patients présenteront des métastases, principalement hépatiques, dans les 10 années suivant le diagnostic. La dissémination métastatique du MU s'effectue uniquement par voie hématogène. Détecter le plus précocement possible la présence de cellules tumorales dans le sang circulant permettrait une prise en charge très précoce des patients, avant la survenue des métastases hépatiques. Depuis quelques années, la biopsie liquide (BL) s'est imposée comme un moyen non invasif, reproductible et prometteur d'obtenir un diagnostic, un pronostic et un suivi théranostique de patients atteints de tumeurs solides. La BL concerne le sang ainsi que tout liquide humain, et permet entre autres d'identifier plusieurs paramètres tumoraux comme les cellules tumorales circulantes (CTCs) ou l'ADN tumoral circulant.L'objectif de ce travail de thèse était d'évaluer la place de la BL, et notamment des CTCs, dans le MU primitif et métastatique.Dans un premier article, nous avons réalisé une revue de la littérature sur les biopsies liquides afin : (i) de faire un état des lieux des connaissances sur la BL dans le MU, (ii) d'identifier les différents marqueurs évaluables dans le MU, (iii) de recenser les différentes techniques d'identification des marqueurs tumoraux , et (iv) de relever les limites techniques actuelles. Nous avons conclu que monitorer les CTC était actuellement le paramètre le plus pertinent dans la mesure où elles sont le reflet vivant de la dissémination spatio-temporelle des cellules tumorales. Nous avons également observé des discordances entre les résultats des différentes études, dues à une grande diversité des techniques pré analytiques et des cohortes analysées.Afin de déterminer la technique la plus adaptée à l'identification des CTC dans le MU, nous avons dans un deuxième article comparé in vitro 4 dispositifs de capture des CTC en utilisant une lignée de MU métastatique (OMM 2.3). Les cellules étaient filtrées à la fois en utilisant du milieu cellulaire (RPMI) et du sang veineux provenant de volontaires sains. Nous avons successivement comparé le Vortex VTX-1 (Biosciences, Pleasanton, CA, USA, système micro fluidique), le ClearCell FX (ClearBridge, Biolidics, Singapore, système micro fluidique), l'ISET (Rarecells, Paris, France, système de filtration par taille) et le Cellseach (Menarini Silicon Biosystems, Florence, Italie, système immun magnétique). Les taux de capture, étaient de 39,2%, 22,2%, 8,9% et 1,1% pour l'ISET, le Vortex VTX-1, le ClearCell FX et le Cellseach, respectivement. Nous avons également comparé ces dispositifs en termes de reproductibilité, de facilité d'utilisation, de rapidité, d'ergonomie, et de capacité à réaliser des analyses cytogénétiques post analytiques. Ces expérimentations nous ont permis d'identifier le dispositif de capture des CTC ainsi que le protocole analytique les plus adaptés. Nous avons mis au point une technique rapide, fiable et reproductible de capture des CTC en utilisant le système de filtration micro fluidique Vortex VTX-1 suivi de l'immunocytochimie par Melan A.Suite aux conclusions de ce travail in vitro, nous avons maintenant débuté l'application clinique chez nos patients présentant un MU primitif ou métastatique en utilisant le système de filtration micro fluidique Vortex VTX-1.Enfin, nous avons publié un 3e article détaillant la mise en place d'une biobanque dédiée à l'onco-ophtalmologie au CHU de Nice. Une biobanque dédiée, sécurisée et accréditée est essentielle pour collecter des échantillons de haute qualité afin de promouvoir la recherche translationnelle et multicentrique en oncologie oculaire.