Etude des populations lymphocytaires T au cours de l’anémie hémolytique auto immune

T cell lymphocytes in warm autoimmune hemolytic anemia

• Auteur / Autrice : Marion Ciudad
• Direction : Sylvain Audia
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Médecine, cancérologie, génétique, hématologie, immunologie
• Date : Soutenance le 29/11/2022
• Etablissement(s) : Bourgogne Franche-Comté
• Ecole(s) doctorale(s) : École doctorale Environnements, Santé (Dijon ; Besançon ; 2012-....)
• Partenaire(s) de recherche : Laboratoire : Interactions hôte-greffon-tumeur et ingénierie cellulaire et tissulaire (RIGHT) (Besançon)
• Partenaire(s) de recherche : Etablissement de préparation : Université de Bourgogne (1970-....)
• Jury : Président / Présidente : Bernard Bonnotte
• Jury : Examinateurs / Examinatrices : Marc Michel
• Jury : Rapporteur / Rapporteuse : Mikaël Ebbo, Frédéric Gros

Mots clés

Mots clés contrôlés

Lymphocytes T folliculaires helper

Érythrocytes

Anémie hémolytique autoimmune

Mots clés libres

Anémie Hémolytique Auto-Immune (AHAI)

Treg

Th17

TNF-Α

Warm Autoimmune Hemolytic Anemia (wAIHA)

Treg

Th17

TNF-Α

Résumé

L'anémie hémolytique auto-immune à auto-anticorps chaud (AIHA) est une maladie auto-immune rare et acquise, médiée par des anticorps ciblant les globules rouges. L'implication des lymphocytes T helper (Th) CD4+ dans la physiopathologie a été peu étudiée et la plupart des résultats sont extrapolés de modèles murins. Bien que cela soit encore débattu, l’AIHA pourrait être associée à une polarisation pro-inflammatoire de type Th17 et à un déficit quantitatif en lymphocytes T régulateurs (Treg).Au cours de ce travail, nous avons réalisé la première étude concomitante des LT effecteurs et des Treg circulants, ainsi qu’une étude fonctionnelle et transcriptomique des Treg de patients atteints d’AHAI au diagnostic.Nous avons observé une orientation des LT effecteurs vers une polarisation Th17 accompagnée d’une diminution des Treg circulants, principalement des Treg effecteurs. Ce déficit quantitatif est associé à une diminution de la capacité des Treg à inhiber la prolifération des LT effecteurs, ce qui semble favoriser d’avantage la polarisation Th17.Le déficit en Treg est associé à une diminution du niveau d’expression de la protéine Foxp3, le facteur de transcription dominant des Treg, qui assure la stabilité de leur phénotype et le maintien de leurs fonctions suppressives. Le profil transcriptomique des Treg des patients a révélé : |1. Un fort engagement des voies de signalisation du TNF dans les Treg, en accord avec une augmentation significative du TNF-α sérique chez les patients. |2. Un rôle possible de mécanismes post-traductionnels conduisant à la dégradation de Foxp3 à l’origine des dysfonctionnements des Treg.A travers ce travail nous rapportons deux observations inédites et importantes pour la compréhension de la physiopathologie de l’AHAI, l’augmentation du TNF-α sérique chez les patients AHAI au diagnostic ainsi que le déficit quantitatif et fonctionnel des Treg circulants. Bien que les aspects mécanistiques ou les liens entre ces deux observations restent à préciser, elles nous permettent d’ores et déjà d’envisager de nouveaux axes thérapeutiques pour les patients tels que le renforcement des populations Treg et/ou la neutralisation de la production du TNF-α.

Warm autoimmune hemolytic anemia (wAIHA) is a rare acquired autoimmune disease mediated by antibodies targeting red blood cells. The involvement of CD4 T helper (Th) cells has been scarcely explored, with most findings extrapolated from animal models. Although it is still debated, wAIHA is thought to be associated with a pro-inflammatory Th17 polarization and a quantitative deficit of regulatory T cells (Treg).In this work, we performed the first concomitant quantification of circulating effector T lymphocytes (Teff) and Treg, associated with functional and transcriptomic analyses of Treg in human wAIHA at diagnosis. We observed a shift towards a Th17 polarization of Teff and a decrease in circulating Treg, notably effector Treg. This quantitative deficit was associated with an impairment of Treg capability to inhibit Teff proliferation and promoted the Th17 skewing. Treg deficiency was related to the diminished Foxp3 protein level, the master transcription factor maintaining phenotype stability and suppressive functions of Treg.The transcriptomic profile of patients' Treg revealed: |1. A strong engagement of TNF signaling pathways in Treg, consistent with serum TNF-α increase in patients. |2. A possible role of post-translational mechanisms leading to Foxp3 downregulation accounting for Treg dysfunctions.Through this work, we report two novel and major observations for the understanding of wAIHA pathophysiology: the increase of serum TNF-α in patients at diagnosis, and both a quantitative and functional deficit of circulating Treg. Although the mechanistic aspects and the links between these two observations remain to be clarified, they allow us to consider new therapeutic axes for patients such as Treg strengthening and/or the neutralization of TNF-α production.