Isolement d'anticorps monoclonaux humains à visée thérapeutique contre le système de sécrétion de type III de Pseudomonas aeruginosa

Therapeutic human monoclonal antibodies isolation against the Type III secretion system of P.aeruginosa

• Auteur / Autrice : Jean-Mathieu Desveaux
• Direction : Pascal Poignard, Andréa Dessen
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Virologie microbiologie immunologie
• Date : Soutenance le 06/12/2022
• Etablissement(s) : Université Grenoble Alpes
• Ecole(s) doctorale(s) : École doctorale chimie et science du vivant (Grenoble ; 199.-....)
• Partenaire(s) de recherche : Laboratoire : Institut de biologie structurale (Grenoble)
• Jury : Examinateurs / Examinatrices : Roger Legrand, Jean-Luc Lenormand
• Jury : Rapporteurs / Rapporteuses : Patrick Plésiat, Stéphanie Simon

Mots clés

Mots clés contrôlés

Infections nosocomiales

Résistance aux antibiotiques

Pseudomonas aeruginosa

Anticorps monoclonaux

Mots clés libres

Anticorps monoclonaux thérapeutiques

P.aeruginosa

Résistance aux antibiotiques

Infection nosocomiale

Therapeutic monoclonal antibodies

P.aeruginosa

Antibiotic resistance

Nosocomial infection

Résumé

Isolement d'anticorps monoclonaux humains à visée thérapeutique contre le système de sécrétion de type III de Pseudomonas aeruginosa.La résistance aux antibiotiques chez les bactéries pathogènes est un problème de santé publique croissant. Ainsi Pseudomonas aeruginosa fait partie des pathogènes hautement virulents et résistants pour lesquels le développement de stratégies thérapeutiques alternatives aux antibiotiques est prioritaire selon l'Organisation Mondiale de la Santé. Des anticorps monoclonaux bloquant les facteurs de virulence bactériens pourraient constituer une telle alternative thérapeutique. Notre objectif a donc été d'isoler, à partir de patients chroniquement infectés par Pseudomonas aeruginosa, des anticorps monoclonaux capables de bloquer le système de sécrétion de type 3 (SST3) de cette bactérie. Le SST3 est une nanomachine macromoléculaire formant une aiguille à la surface de la bactérie et permettant l'injection de toxines dans le cytoplasme des cellules de l'hôte. Ce système a été décrit comme un mécanisme majeur de pathogenèse de Pseudomonas aeruginosa. Grâce à une approche de tri par cytométrie de flux de cellules B mémoires spécifiques nous avons isolé des anticorps monoclonaux contre deux protéines du SST3, PcrV et PscF. Deux anticorps reconnaissant PcrV ont démontré une activité d'inhibition du SST3 et vont être étudiés pour leur potentiel thérapeutique. Notre approche pourra dans le futur être étendue à l'isolement d'anticorps contre d'autres facteurs de virulence et d‘autres bactéries, permettant potentiellement le développement d'anticorps monoclonaux thérapeutiques pour contrer la résistance aux antibiotiques.

Isolation of therapeutic human monoclonal antibodies against the type III secretion system of Pseudomonas aeruginosa.Antibiotic resistance in pathogenic bacteria is a growing public health problem. Pseudomonas aeruginosa is one of the highly virulent and resistant pathogens for which the development of alternative therapeutic strategies to antibiotics is a priority according to the World Health Organization. Monoclonal antibodies blocking bacterial virulence factors could constitute such a therapeutic alternative. Our objective was therefore to isolate, from patients chronically infected with Pseudomonas aeruginosa, monoclonal antibodies capable of blocking the type 3 secretion system (T3SS) of this bacterium. The T3SS is a macromolecular nanomachine that forms a needle on the surface of the bacterium and allows the injection of toxins into the cytoplasm of host cells. This system has been described as a major mechanism of pathogenesis of Pseudomonas aeruginosa. Using a flow cytometry sorting approach of specific memory B cells, we isolated monoclonal antibodies against two T3SS proteins, PcrV and PscF. Two antibodies directed against PcrV showed T3SS inhibitory activity and will be studied for their therapeutic potential. Our approach can be extended in the future to the isolation of antibodies against other virulence factors and other bacteria, potentially allowing the development of therapeutic monoclonal antibodies to counter antibiotic resistance.