Etude de l’effet des lignes de traitement sur l’activité des CAR T dans le myélome multiple

Impact of treatments on CAR T cells functions in multiple myeloma

• Auteur / Autrice : Audrey Abecassis
• Direction : Jean-Christophe Bories
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Hématologie
• Date : Soutenance le 08/03/2021
• Etablissement(s) : Université Paris Cité
• Ecole(s) doctorale(s) : École doctorale Hématologie, oncogenèse et biothérapies (Paris ; 2014-....)
• Partenaire(s) de recherche : Laboratoire : Immunologie humaine, physiopathologie & immunothérapie (Paris)
• Jury : Président / Présidente : Jérôme Larghero
• Jury : Examinateurs / Examinatrices : Jérôme Larghero, Stéphanie Nguyen Quoc, Salomon Manier, Danièle Bensoussan-Lejzerowicz, Jill Corre, Mike Burbridge
• Jury : Rapporteurs / Rapporteuses : Stéphanie Nguyen Quoc, Salomon Manier

Mots clés

Mots clés contrôlés

Récidive

Antigène de maturation des cellules B

Récepteurs chimériques pour l'antigène

thérapie

Myélome multiple

Mots clés libres

Myélome Multiple

CAR T (Récepteurs Antigéniques Chimériques)

CS1

BCMA (B Cell Maturation Antigen)

Rechute

Daratumumab

Multiple Myeloma

CAR T

CS1

BCMA (B Cell Maturation Antigen)

Relapse

Daratumumab

Résumé

Le Myélome Multiple (MM) est une hémopathie maligne qui touche environ 5000 nouveaux patients par an en France. Les traitements de référence associant les Immunomodulateurs, les inhibiteurs du Protéasome et plus récemment les anticorps monoclonaux comme le Daratumumab (Anti-CD38), ont permis une amélioration de la prise en charge des malades. Cependant, le MM reste à ce jour incurable, avec un taux de survie de 50% à 5 ans, nécessitant l'élaboration de nouvelles stratégies thérapeutiques. Parmi elles, l'utilisation de lymphocytes T (LyT) autologues exprimant un récepteur antigénique chimérique (CAR-T), permettant la reconnaissance et l'élimination de cellules cancéreuses exprimant un antigène choisi, a été validée dans différentes hémopathies lymphoïdes en ciblant l’antigène CD19. Dans le MM, les CAR-T ciblant le B Cell Maturation Antigen (BCMA) induisent de bonnes réponses chez des patients ayant reçu plusieurs lignes de chimiothérapie. Mais la rémission reste limitée et les malades rechutent dans l'année, ce qui contraste avec ce qui a été observé pour les CAR-T CD19. Ces résultats laissent penser que les traitements de première ligne, administrés aux patients du MM, pourraient impacter l'efficacité de la thérapie par CAR-T. Dans ce travail, nous proposons une caractérisation phénotypique des T de patients au diagnostic (n=26), en rechute de chimiothérapie (n=23), sous Daratumumab (n=30) mais également en rechute de Daratumumab (n=10). Par ailleurs, nous avons transduit ces cellules avec des CAR anti-CS1 et anti-BCMA, surexprimés sur les plasmocytes tumoraux, afin d'étudier leurs propriétés fonctionnelles (n=10). Nos résultats montrent que les LyT des patients en rechute présentent des défauts phénotypiques majeurs tels que l’inversion du ratio CD4/CD8, la diminution du phénotype naïf (CD62+CD45RO-), du marqueur lié à l’activation (CD25) et l’augmentation du marqueur d’épuisement (PD1). Ils montrent également in vitro que les CAR-T anti-CS1 issus de ces patients ont des capacités prolifératives diminuées en réponse à l'antigène et une capacité lytique antitumorale altérée. Par ailleurs, nous observons également que les capacités fonctionnelles des CAR T produites à partir de cellules de patients traités par Daratumumab sont réactivées. Des résultats similaires sont obtenus avec des CAR-T anti-BCMA, indiquant que les défauts sont indépendants de l'antigène ciblé. Ces données montrent que les cellules T des patients en rechute présentent des caractéristiques d'épuisement pouvant réduire leur capacité thérapeutique. L'ensemble de ces résultats ouvre de nouvelles perspectives dans l’optimisation de la stratégie thérapeutique par CAR T dans le MM.

Multiple Myeloma (MM) is the second most important hematologic disorder represented by 5000 new cases each year in France. Standards of care as Immunomodulators, Proteasom inhibitors or more recently monoclonal antibodies like Daratumumab (anti-CD38), allowed an improvement in patient care. Despite these advances, MM still incurable with an overall survival close to 50% at 5 years, needing new strategies. The use of autologous T cells expressing a chimeric receptor (CAR T), targeting CD19+ cells, have been validated in the treatment of lymphoid blood diseases like LLA and lymphoma. In MM, CAR T anti-BCMA had good responses on relapsed/refractory patients but still limited, having relapse after 1 year. These results could mean that therapeutic first lines impact CAR T cells efficiency. Here, we propose to characterize T cell phenotype from patients at diagnosis (n=26), at relapse (n=23), under treatment with Daratumumab (n=30) or at relapse after Daratumumab (n=10). We also transduced cells with anti-CS1 and anti-BCMA CARs, overexpressed antigens on tumoral plasma cells, to analyze their functional capacities (n=10). Our results show that T cells from patients at relapse had phenotypic dysfunctions like CD4/CD8 inversion ratio, naïve phenotype decreased (CD62+CD45RO-), activation marker (CD25) decreased and exhaustion marker (PD1) increased. In vitro, they also show that CAR T anti-CS1 from patient at relapse had reduced functional capacities. Furthermore, CAR T cells functions from patient under Daratumumab are revived. Similar results are obtained with CAR T anti-BCMA, showing that there is no relation between dysfunctions and the targeted antigen. Our results indicate that T cells from patient at relapse have exhausted properties, which probably reduce their therapeutic effect. This data opens new horizon on the CAR T cells optimizations for MM treatment.