Rôle de la protéine Navβ4 dans les cellules épithéliales mammaires cancéreuses et non-cancéreuses

Role of the Navβ4 protein in cancerous and non-cancerous mammary epithelial cells

• Auteur / Autrice : Adelaide Doray
• Direction : Sébastien Roger
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences de la vie et de la santé
• Date : Soutenance le 24/06/2021
• Etablissement(s) : Tours
• Ecole(s) doctorale(s) : École doctorale Santé, Sciences Biologiques et Chimie du Vivant (Centre-Val de Loire ; 2012-....)
• Partenaire(s) de recherche : Laboratoire : Transplantation, Immunologie et Inflammation
• Jury : Président / Présidente : Pascale Reverdiau
• Jury : Examinateurs / Examinatrices : Raphaël Rapetti-Mauss, Christophe Baron
• Jury : Rapporteur / Rapporteuse : Norah Defamie, Mathieu Gautier

Mots clés

Mots clés contrôlés

Cancer du sein

Cancer colorectal

ARN -- Modifications posttranscriptionnelles

Transcription génétique

Expression génique

Transition épithélio-mésenchymateuse

Cellules épithéliales

Cancérogenèse

Bêta-caténine

Interactions nanoparticule-protéine

Mots clés libres

Navβ4

Β-Caténine

Migration/invasion cellulaire

Gène SCN4B

Navβ4

Β-Catenin

Cell migration/invasion

Epithelial-Mesenchymal transition

Résumé

Des résultats acquis de notre laboratoire ont montré que l’expression de la sous-unité auxiliaire de canaux sodiques dépendants du voltage NavB4 (gène SCN4B) est réduite dans les tissus cancéreux mammaires par rapport aux tissus non cancéreux. Cependant, le rôle de cette protéine dans les cellules épithéliales mammaires non cancéreuses n’est pas caractérisé.Pour répondre à cette question, nous avons modifié son expression dans les cellules de la lignée épithéliale mammaire non cancéreuse MCF10A, par des techniques de CRISPR/Cas9 et d’ARN interférents. Nous montrons que la réduction d’expression de NavB4 entraîne une désorganisation cellulaire, augmente la dégradation de la matrice extracellulaire et favorise la transition épithélio-mésenchymateuse. La réduction d’expression de NavB4 dans ces cellules induit également une diminution d’expression de la B-caténine par une augmentation de sa dégradation. Par ailleurs, la réexpression plasmidique de NavB4 dans les cellules CRISPR induit une diminution de l’expression transcriptionnelle des marqueurs mésenchymateux vimentine et N-cadhérine. La réduction d’expression de NavB4 dans les cellules de la lignée cancéreuse mammaire humaine MDA-MB-231 entraîne une augmentation de l’invasion cellulaire et diminue l’expression transcriptionnelle de la B-caténine et E-cadhérine.En conclusion, l’ensemble de nos résultats suggèrent que l’expression de NavB4 participerait au maintien du phénotype épithélial dans les cellules mammaires et la réduction de son expression pourrait être une étape déterminante de la carcinogenèse.

Results from our laboratory show that expression of NavB4 voltage gated sodium channel auxiliary subunit (SCN4B gene) is decreased in cancer tissues compared to non-cancerous ones. However, its role in non-cancerous mammary epithelial cells is not described.To answer this question, we used the MCF10A mammary cell line in which we genetically modified for the NavB4 gene by CRISPR/Cas-9 and siRNA techniques. We show that down-expression of NavB4 leads to cellular disorganisation, increases extracellular matrix degradation, and promotes epithelial-mesenchymal transition. The down-expression of NavB4 in these cells also decreases B-catenin expression by an increase of its degradation.The overexpression of NavB4 in these cells leads to a decrease of mesenchymal markers such as vimentin and N-cadherin. The down-expression of NavB4 in the MDA-MB-231 human cancer mammary cell line promotes cellular invasiveness and decreases transcriptional expression of B-catenin and E-cadherin.Overall, our results suggest that NavB4 may participate in the maintenance of the epithelial phenotype in mammary cells and that its down-expression might be a determining step in the carcinogenesis.