Apport du test de génération de thrombine dans différents modèles d’hypercoagulabilité et de dysfonction endothéliale.

Contribution of the thrombin generation assay in hypercoagulability models of endothelial dysfunction

• Auteur / Autrice : Paul Billoir
• Direction : Véronique Duchez, Ygal Benhamou
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Aspects moleculaires et cellulaires de la biologie
• Date : Soutenance le 13/12/2021
• Etablissement(s) : Normandie
• Ecole(s) doctorale(s) : École doctorale Normande de biologie intégrative, santé, environnement (Mont-Saint-Aignan, Seine-Maritime)
• Partenaire(s) de recherche : Equipe de recherche : EnVi - Endothélium, valvulopathies et insuffisance cardiaque (Rouen ; 2012...)
• Partenaire(s) de recherche : Laboratoire : Endothélium- valvulopathies et insuffisance cardiaque / EnVI
• Partenaire(s) de recherche : établissement de préparation : Université de Rouen Normandie (1966-....)
• Jury : Président / Présidente : Pascale Gaussem
• Jury : Examinateurs / Examinatrices : Véronique Duchez, Ygal Benhamou, Pascale Gaussem, Jérémy Bellien, Luc Darnige
• Jury : Rapporteurs / Rapporteuses : Philippe Nguyen, Véronique Regnault

Mots clés

Mots clés contrôlés

Troubles de la coagulation du sang

Syndrome antiphospholipide

Fibrose pulmonaire

Thrombine

Thrombophilie

SARS-CoV-2 (virus)

Mots clés libres

Hypercoagulabilité

Test de génération de thrombin

Syndrome des antiphospholipides

Fibrose pulmonaire idiopathique

Infection à SARS-CoV-2

Hypercoagulability

Thrombin generation assay

Antiphospholipid syndrome

Idiopathic pulmonary fibrosis

SARS-CoV-2 infection

Résumé

Ce travail a permis d’évaluer l’apport du test de génération de thrombine dans des modèles de cultures cellulaires, dans un modèle murin de SAPL, et chez des patients atteints d’une dysfonction endothéliale entrainant un état d’hypercoagulabilité. Les anticorps antiphospholipides entrainent une diminution de l’ePCR, induisant résistance à la protéine C activée, retrouvée dans nos différents modèles et patients. Le traitement par l'hydroxychloroquine dans le modèle expérimental de SAPL, a montré un effet protecteur de ce traitement sur la fonction endothéliale, en restaurant la vasorelaxation et une normalisation de la génération de thrombine après injection d'anticorps antiphospholipides purifiés. Il a été démontré un état hypercoagulable, associé au développement d’embolie pulmonaire, au cours de la fibrose pulmonaire idiopathique. Les progéniteurs endothéliaux circulants de patients atteints de fibrose pulmonaire idiopathique, induisent un état d’hypercoagulabilité, associé à une hypoexpression de thrombomoduline. Ces résultats ouvrent une piste thérapeutique. Actuellement des essais cliniques testent la thrombomoduline comme thérapeutique potentielle. Récemment, une pandémie par Sars-CoV-2, est associée à un état hypercoagulable, avec le développement de thromboses multiples, retrouvées lors d’autopsies de patients. Nous avons démontré l’intérêt du test de génération de thrombine comme facteur pronostique au cours de l’infection à Sars-CoV-2, prédisant l’hospitalisation en réanimation des patients. Le test de génération de thrombine semble être un outil intéressant au cours de l’atteinte endothéliale induisant une hypercoagulabilité dans des modèles transversaux, et laisse entrevoir de possibles pistes thérapeutiques, comme la modulation du glycocalyx dans le SAPL.

This work evaluated the contribution of the thrombin generation assay in cell culture models, in a mouse model of APS, and in patients with endothelial dysfunction leading to a hypercoagulable state. Antiphospholipid antibodies cause a decrease in ePCR, inducing resistance to activated protein C, found in our different models and patients. Treatment with hydroxychloroquine in the experimental model of APS showed a protective effect of this treatment on endothelial function, restoring vasorelaxation and normalizing thrombin generation after injection of purified antiphospholipid antibodies. A hypercoagulable state, associated with the development of pulmonary embolism, has been demonstrated in idiopathic pulmonary fibrosis. Circulating endothelial progenitors from patients with idiopathic pulmonary fibrosis induce a hypercoagulable state associated with hypoexpression of thrombomodulin. These results open a therapeutic avenue. Currently, clinical trials are testing thrombomodulin as a potential therapeutic. Recently, a pandemic by Sars-CoV-2, is associated with a hypercoagulable state, with the development of multiple thrombosis, found during autopsies of patients. We have demonstrated the value of the thrombin generation test as a prognostic factor during Sars-CoV-2 infection, predicting the hospitalization of patients in intensive care. The thrombin generation test seems to be an interesting tool during endothelial damage inducing hypercoagulability in cross-sectional models, and suggests possible therapeutic avenues, such as the modulation of the glycocalyx in APS.