ROBO4v dans des cellules métastatiques de cancer du sein, étude d’un variant protéique issu d’une transcription alternative

ROBO4v in metastatic breast cancer cells, study of a protein variant from alternative transcription

• Auteur / Autrice : Loïc Gaweda
• Direction : Chantal Diaz
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Cancérologie
• Date : Soutenance le 25/11/2021
• Etablissement(s) : Lyon
• Ecole(s) doctorale(s) : École doctorale de Biologie Moléculaire Intégrative et Cellulaire (Lyon ; 1999-....)
• Partenaire(s) de recherche : établissement opérateur d'inscription : Université Claude Bernard (Lyon ; 1971-....)
• Partenaire(s) de recherche : Laboratoire : Physiopathologie, Diagnostic et Traitements des Maladies Osseuses (Lyon)
• Jury : Président / Présidente : Edith Bonnelye
• Jury : Examinateurs / Examinatrices : Chantal Diaz, Martine Duterque-Coquillaud, Christophe Ginestier, Philippe Clézardin, Frédéric Moret
• Jury : Rapporteurs / Rapporteuses : Martine Duterque-Coquillaud, Christophe Ginestier
• DOI : 10.70675/2e25b7faz1951z49baz99c2z20e963c08d77

Mots clés

Mots clés contrôlés

Cellules tumorales circulantes

Transport biologique

Métastases osseuses

Cancer du sein

Mots clés libres

ROBO4

ROBO4s

ROBO4v

Métastases osseuses

Cancer du sein

Épissage alternatif

Molécules d’adhérence

ICAM-1

ROBO4

ROBO4s

ROBO4v

Bone metastases

Breast cancer

Alternative splicing

Adherence molecules

ICAM-1

Résumé

Bien que les progrès en matière de dépistage et de thérapie permettent une prise en charge toujours plus efficace des cancers du sein, ils représentent toujours la première cause de mortalité par cancer chez la femme. Le développement de métastases osseuses fait partie des complications les plus fréquentes dans ces cancers, affectant plus de 70% des patientes à un stade avancé. Les traitements actuels ne sont que palliatifs. Comprendre les mécanismes moléculaires régulant l’ancrage précoce des cellules tumorales à l’os est donc d’un intérêt sanitaire majeur. Une analyse transcriptomique comparative entre la lignée de cancer du sein triple négatif MDA-MB-231 métastasant dans différents organes chez la souris et une sous-population de cette lignée, nommée B02, métastasant spécifiquement à l’os, a mis en évidence une surexpression de ROBO4, un récepteur transmembranaire faisant partie de la famille des récepteurs de guidage axonal Roundabout (ROBO), connue pour jouer un rôle dans l’angiogenèse, le maintien de l’intégrité vasculaire ainsi que dans l’ancrage des cellules souches hématopoïétiques à la moelle osseuse. De précédentes études au laboratoire ont démontré l’existence de deux isoformes de ROBO4 dans les cellules endothéliales : ROBO4s, une forme de 160 kDa décrite dans la littérature, et ROBO4v, nouvellement découverte, de 92 kDa. Les cellules de cancers du sein expriment également ROBO4, mais ne produisent, que ROBO4v. Un séquençage des ARNm totaux a mis en évidence une incroyable diversité de transcrits pouvant expliquer l’origine de ce nouveau variant, impliqué dans les interactions entre cellules tumorales. Dans ce contexte, nous avons démontré un lien entre la présence de ROBO4 dans les cellules tumorales et leur expression d’ICAM-1, impliquée dans les interactions cellulaires et la différenciation des ostéoclastes. Ces résultats permettent ainsi de mieux comprendre le rôle de ROBO4 dans la formation de métastases osseuse.

Although advances in screening and therapy have made breast cancer increasingly effective, it is still the leading cause of cancer death in women. The development of bone metastases is one of the most frequent complications of these cancers, affecting more than 70% of patients at an advanced stage. Current treatments are only palliative. Understanding the molecular mechanisms regulating the early anchorage of tumor cells to bone is therefore of major health interest. A comparative transcriptomic analysis between the triple-negative breast cancer line MDA-MB-231 metastasizing to different organs in mice and a subpopulation of this line, named B02, metastasizing specifically to bone, revealed an overexpression of ROBO4 a transmembrane receptor belonging to the Roundabout axon guidance receptor (ROBO) family, known to play a role in angiogenesis, maintenance of vascular integrity and anchoring of hematopoietic stem cells to the bone marrow. Previous laboratory studies have demonstrated the existence of two isoforms of ROBO4 in endothelial cells: ROBO4s, a 160 kDa form described in the literature, and the newly discovered ROBO4v, of 92 kDa. Breast cancer cells also express ROBO4, but produce only ROBO4v. Total mRNA sequencing revealed an incredible diversity of transcripts that could explain the origin of this new variant, involved in tumor cell interactions. In this context, we demonstrated a link between the presence of ROBO4 in tumor cells and their expression of ICAM-1, involved in cell-cell interactions and osteoclast differentiation. These results provide a better understanding of the role of ROBO4 in bone metastasis.