Fasciculation axonale et dynamique du cône de croissance en environnement confiné
Auteur / Autrice : | Audric Jan |
Direction : | Catherine Villard, Christian Specht |
Type : | Thèse de doctorat |
Discipline(s) : | Physique |
Date : | Soutenance le 26/11/2020 |
Etablissement(s) : | Université Paris sciences et lettres |
Ecole(s) doctorale(s) : | École doctorale Physique en Île-de-France (Paris ; 2014-....) |
Partenaire(s) de recherche : | Laboratoire : Physico-chimie Curie (Paris ; 1996-....) - Physico-Chimie-Curie |
établissement opérateur d'inscription : Institut Curie (Paris ; 1978-....) | |
Jury : | Président / Présidente : Patricia Bassereau |
Examinateurs / Examinatrices : Catherine Villard, Christian Specht, Benoît Charlot, Mireille Montcouquiol, Marie Bréau, Christophe Leterrier | |
Rapporteurs / Rapporteuses : Benoît Charlot, Mireille Montcouquiol |
Mots clés
Résumé
La navigation des axones est une étape cruciale du développement des réseaux neuronaux. Elle s’opère via divers mécanismes de guidage du cône de croissance (GC), une structure motile et riche en actine localisée à l’extrémité des neurites. Dans de nombreux cas, les axones progressent vers leur destination en formant des faisceaux. Dans cette étude, nous utilisons des puces microfluidiques composées de micro-canaux axonaux de différentes largeurs pour induire et étudier la fasciculation. Nous montrons que les faisceaux sont constitués de deux populations d’axones, les pionniers et les suiveurs, qui se distinguent par leur comportement et la morphologie du GC. Les pionniers adoptent un comportement exploratoire caractérisé par une alternance d’avancées et de pauses alors que les suiveurs ont une croissance plus rapide et des pauses moins fréquentes. L’analyse morphologique des GC révèle que ces structures sont plus larges chez les pionniers alors que ceux des suiveurs ont une forme plus allongée. Curieusement, lorsque les GC des pionniers sont fortement confinés et ainsi contraints d’adopter la morphologie des suiveurs, ils en acquièrent également le comportement et la dynamique. Ces résultats nous ont amené à nous interroger sur la nature du lien existant entre la forme et la dynamique du GC. Nous avons entrepris d’investiguer cette question par une étude de l’organisation et de la dynamique du cytosquelette d’actine en microscopie super-résolutive. Les résultats obtenus semblent indiquer que l’orientation des filaments définit un angle plus étroit chez les suiveurs et les pionniers très confinés que chez les pionniers non confinés. De plus, les mesures de vitesse du flux rétrograde d’actine (ARF) dans les GC révèlent un flux plus rapide pour les pionniers non confinés. La vitesse de l’ARF étant inversement proportionnelle à la vitesse de migration des cellules, ces résultats expliqueraient les différentes dynamiques de croissance des pionniers et des suiveurs. De prochaines investigations visant à quantifier la quantité ou la densité de filaments d’actine, ainsi que leur couplage à des molécules d’adhésion cellulaire, nous permettrons d’améliorer notre compréhension des mécanismes moléculaires mis en oeuvre dans ces deux populations d’axones.