Enteric disorders at weaning : age, amoxicillin administration and Enterotoxigenic Escherichia coli infection affecting the gut microbiota of piglets - TEL - Thèses en ligne Accéder directement au contenu
Thèse Année : 2020

Enteric disorders at weaning : age, amoxicillin administration and Enterotoxigenic Escherichia coli infection affecting the gut microbiota of piglets

Désordres entériques au sevrage : âge, administration d'amoxicilline et infection par Escherichia coli entérotoxigénique influençant le microbiote intestinal des porcelets

Disturbi enterici allo svezzamento : età, somministrazione di amoxicillina e infezione da Escherichia coli enterotossigeno : influenza del microbiota intestinale in suinetti

Résumé

In pig production systems, weaning is a crucial period characterized by nutritional, environmental and social stress. During this process, piglets are susceptible to diarrhoea and the gut ecosystem needs to adapt to dietary changes, from a milk-based diet to a solid and more complex cereal-based feed, and to environmental pathogen pressure. One of the most important etiological agent of the post-weaning diarrhoea (PWD) is the Enterotoxigenic Escherichia coli (ETEC) able to cause severe outcomes and considerable economic losses to farmers worldwide. A role of host genetics in infection appearance is well-established, the SNPs located on the Mucine 4 (MUC4) and Fucosyltransferase 1 (FUT1) genes being associated with the susceptibility to ETEC F4 and ETEC F18, respectively.To investigate aspects related to weaning diarrhoea, two studies have been performed. The aim of the first study was to evaluate the impact of weaning age on gut microbiota diversification in piglets comparing animals at different weaning ages. Forty-eight Large White piglets were divided into four groups of 12 animals weaned at 14 days old (early weaning), 21 or 28 days old (main weaning ages in pig intensive farming) and 42 days old (late weaning). In each group, faecal bacteria composition was assessed by sequencing the 16S rRNA gene of faecal DNA on the weaning day, 7 days post-weaning and at 60 days of age. Our results showed that late weaning increases the gut microbiota diversity including a higher abundance of Faecalibacterium prausnitzii, reported as beneficial in humans. Our results suggest than the pre-weaning gut microbiota composition conferred by a late weaning at 42 days of age could enhance gut health in piglets. This would provide a competitive advantage to piglets accumulating a higher diversity of potentially beneficial microbes prior to the stressful and risky weaning transition.The aim of the second study was to evaluate the effects of the host-genotype and different routes of amoxicillin administration on the presence of diarrhoea and the microbiota composition, during a natural infection by multi-resistant ETEC strains in weaned piglets. For this purpose, seventy-one piglets were divided into three groups: two groups differing by amoxicillin administration routes – parenteral (P) or oral (O) and a control group without antibiotics (C). Our results confirmed the MUC4 and FUT1 as host genetic markers for the susceptibility to ETEC infections. Moreover, our data highlighted that amoxicillin treatment may produce adverse outcomes on pig health in course of multi-resistant ETEC infection and this effect is stronger when the antibiotic is orally administered than parenterally.Both studies highlighted the importance of alternative control measures related to farm management in controlling weaning related diarrhoea. With a need to limit the use of antibiotics, selection of resistant genotypes, next-generation probiotics supplementation in feed, and correct procedures of weaning age, should be considered in farm management practices in order to preserve a balanced and stable gut microbiota and consequently reduce occurrence of diarrhoea at weaning.
En élevage porcin, le sevrage est une période critique caractérisée par un stress nutritionnel, environnemental et social, avec une forte sensibilité des animaux à la diarrhée. Le microbiote intestinal doit s'adapter à un changement alimentaire, avec le passage d'une alimentation lactée à un aliment plus complexe à base de céréales, et les animaux sont soumis à la pression exercée par les agents infectieux environnementaux. Les bactéries entérotoxiques Escherichia coli (ETEC) sont les principaux agents pathogènes responsables de la diarrhée post-sevrage et peuvent entrainer des pertes économiques considérables. Le rôle de la génétique de l’hôte dans la sensibilité à l'infection est bien établi, le polymorphisme des gènes Mucine 4 (MUC4) et Fucosyltransférase 1 (FUT1) étant associé à la sensibilité à ETEC F4 et F18, respectivement. Nous avons réalisé deux études afin d’analyser l’effet de facteurs pouvant influer sur la sensibilité des porcelets à la diarrhée au sevrage. Dans une première étude, nous avons évalué l'impact de l'âge au sevrage sur la diversification du microbiote intestinal, par comparaison du microbiote d’animaux sevrés à différents âges. Quarante-huit porcelets de race Large White ont été répartis en quatre groupes de 12 animaux sevrés à 14 jours (sevrage précoce), 21 ou 28 jours (âge au sevrage courant en élevage intensif) et 42 jours (sevrage tardif). La composition bactérienne du microbiote a été établie par séquençage du gène de l'ARNr 16S d’ADN fécal extrait de selles prélevées le jour du sevrage, sept jours après et à l'âge de 60 jours. Nous avons montré que le sevrage tardif augmente la diversité du microbiote, avec une plus grande abondance de Faecalibacterium prausnitzii identifiée comme bénéfique chez l'homme. Ces résultats suggèrent que la composition du microbiote intestinal pré-sevrage conférée par un sevrage à 42 jours pourrait améliorer la santé intestinale des porcelets, en leur permettant d’acquérir un microbiote plus diversifié avec des bactéries potentiellement bénéfiques lors du sevrage. La seconde étude a eu comme objectif d’évaluer, chez des porcelets sevrés, les effets du génotype des gènes MUC4 et FUT1 et des voies d'administration de l’amoxicilline sur la présence de diarrhée et la composition du microbiote fécal, lors d'une infection naturelle par des souches d'ETEC multirésistantes. Soixante et onze porcelets ont été répartis en trois groupes: deux groupes se différenciant par la voie d'administration de l'amoxicilline, parentérale (P) ou orale (O), et un groupe témoin sans antibiotiques (C). Nous avons confirmé que MUC4 et FUT1 sont des marqueurs génétiques de l’hôte pour la sensibilité aux infections à ETEC et montré que le traitement à l'amoxicilline pouvait avoir des effets néfastes sur la santé du porc au cours d'une infection à ETEC multirésistante, accentués lors d’une administration par voie orale. Les deux études ont mis en évidence l’importance de considérer des méthodes alternatives de conduite d’élevage. Avec la nécessité de limiter l'utilisation d'antibiotiques, la sélection de génotypes résistants, la supplémentation en next-generation probiotics dans l’alimentation et une meilleure optimisation de l'âge au sevrage devraient être prises en compte dans les pratiques, afin de favoriser un microbiote intestinal diversifié, capable de réduire les diarrhées au sevrage.
Lo svezzamento rappresenta un momento cruciale nell’allevamento suinicolo ed è caratterizzato da stress nutrizionale, ambientale e sociale. In questa fase, i suinetti risultano a maggior rischio di insorgenza di diarrea in quanto la microflora intestinale deve adattarsi ai cambiamenti alimentari legati al passaggio da una dieta a base lattea ad un alimento solido a base di cereali e più complesso e all’elevata pressione infettiva ambientale. Uno dei più importanti agenti eziologici responsabili della diarrea post-svezzamento (PWD) è Escherichia coli Enterotossigeno (ETEC) in grado di provocare gravi quadri clinici nonché ingenti perdite economiche per gli allevatori. Che ci sia una componente genetica nell'evoluzione di queste infezioni è stato ben definito attraverso l’individuazione degli SNP situati sui geni Mucine 4 (MUC4) e Fucosyltransferase 1 (FUT1) associati rispettivamente alla suscettibilità nei confronti di ETEC F4 e ETEC F18. Nella presente tesi sono illustrati due studi che hanno avuto l’obiettivo di approfondire alcuni aspetti legati alla comparsa di diarrea durante lo svezzamento. Lo scopo del primo studio è stato quello di valutare l'impatto dell'età di svezzamento sulla diversità del microbiota intestinale, confrontandone la composizione in suinetti svezzati a diverse età. Quarantotto suinetti di razza Large-White sono stati suddivisi in quattro gruppi da 12 soggetti, svezzati rispettivamente a 14 giorni di età (svezzamento precoce), a 21 o 28 giorni (età di svezzamento principale nell'allevamento intensivo) e a 42 giorni (svezzamento tardivo). In ogni gruppo è stata valutata la composizione batterica fecale il giorno dello svezzamento, 7 giorni post-svezzamento e a 60 giorni di età, sequenziando il gene 16S rRNA dal DNA batterico fecale. I risultati ottenuti hanno evidenziato come lo svezzamento tardivo aumenti il grado di diversificazione del microbiota intestinale, aumentando l’abbondanza di Faecalibacterium prausnitzii, già considerato benefico per l'uomo. Emerge, inoltre, come la composizione del microbiota intestinale nel pre-svezzamento associata allo svezzamento tardivo incrementi il livello di salute intestinale nei suinetti. Tale condizione, comporterebbe un notevole vantaggio per gli animali che acquisiscono una maggiore differenziazione del microbiota intestinale, incrementando l’abbondanza di batteri beneficiali prima di affrontare lo stress dello svezzamento. Lo scopo del secondo studio è stato quello di valutare gli effetti del genotipo dell’ospite e le vie di somministrazione dell’amoxicillina sulla comparsa della diarrea e sulla composizione del microbiota intestinale, durante un'infezione naturale causata da ETEC multi-resistente, in suinetti svezzati. A tale scopo, settantuno suinetti sono stati divisi in tre gruppi: due gruppi diversificati dalla via di somministrazione dell’amoxicillina - parenterale (P) o orale (O), e un terzo gruppo di controllo in cui non sono stati somministrati antibiotici (C). I risultati ottenuti hanno confermato il ruolo di MUC4 e FUT1 quali marcatori genetici di suscettibilità alle infezioni da ETEC. Inoltre, i nostri dati hanno evidenziato come la somministrazione di amoxicillina possa influenzare negativamente lo stato di salute dei suini in corso di infezione da ETEC, effetti ancora più evidenti quando la somministrazione antibiotica avviene per via orale. Entrambi gli studi hanno sottolineato l'importanza di adottare misure alternative legate al management aziendale per il controllo della diarrea post-svezzamento. Nell’ottica di limitare l'utilizzo di antibiotici, azioni quali la selezione di genotipi resistenti, l'integrazione di probiotici di nuova generazione nei mangimi ed una corretta gestione dell’età di svezzamento, dovrebbero essere prese in considerazione nelle pratiche gestionali aziendali al fine di preservare un microbiota intestinale equilibrato e stabile e di conseguenza ridurre l'insorgenza di diarrea allo svezzamento
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  • HAL Id : tel-02899340 , version 1

Citer

Francesca Romana Massacci. Enteric disorders at weaning : age, amoxicillin administration and Enterotoxigenic Escherichia coli infection affecting the gut microbiota of piglets. Veterinary medicine and animal Health. Université Paris-Saclay; Università degli studi (Bologne, Italie), 2020. English. ⟨NNT : 2020UPASS073⟩. ⟨tel-02899340⟩
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