Rôle de la petite GTPase Rab32 dans l'activation des cellules T CD8+ par les cellules dendritiques de type 1 conventionnelles

Role of small GTPase Rab32 in CD8+ T cell cross-priming by conventional type 1 Dendritic Cells

• Auteur / Autrice : Naman Tandon
• Direction : Pierre Guermonprez, Philippe Verbeke
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Immunologie
• Date : Soutenance le 16/06/2020
• Etablissement(s) : Université Paris Cité
• Ecole(s) doctorale(s) : École doctorale Bio Sorbonne Paris Cité (Paris ; 2014-....)
• Partenaire(s) de recherche : Laboratoire : Centre de recherche sur l'inflammation (Paris ; 2014-....)
• Jury : Président / Présidente : Jean-Michel Sallenave
• Jury : Examinateurs / Examinatrices : Pierre Guermonprez, Philippe Verbeke, Jean-Michel Sallenave, Géraldine Schlecht-Louf
• Jury : Rapporteurs / Rapporteuses : Nicolas Blanchard, Johan Garaude

Mots clés

Mots clés contrôlés

Cross-priming

Lymphocytes T CD8+

immunologie

Protéines G rab

métabolisme

Cellules dendritiques

Mots clés libres

CDC1

Rab32

Antigènes cellulaires

CDC1

Rab32

Cellular antigens

Résumé

Les cellules dendritiques classiques de type 1 (cDC1) activent efficacement les cellules T CD8+ naïves pour reconnaitre des antigènes cellulaires dérivés de cellules nécrotiques, de cellules virales infectées ou de cellules tumorales in-vivo. Cette la spécialisation fonctionnelle résulte des caractéristiques spécifiques aux cDC1, telles que la capacité d'internaliser et de transporter les antigènes cellulaires des tissus périphériques aux ganglions lymphatiques drainants, et la capacité unique de présentation croisée des antigènes internalisés. En conséquence, il est intéressant d'étudier comment les protéines exprimées spécifiquement par les cDC1 affectent la fonction de ces cellules. Parmi ces protéines, les petites GTPases de type Rab sont des régulateurs clé du système endocytique qui favorisent l’activation via la présentation croisée des cellules T CD8+ naïves in-vivo. Le but de cette thèse a été d’étudier dans les cDC1 le rôle de la GTPase Rab32 dans l’activation des cellules T CD8+ naïves contre les antigènes cellulaires. Nous avons identifié Rab32 comme étant fortement et différentiellement exprimé dans les cDC1 par rapport aux cDC2. En utilisant des souris déficientes pour Rab32, nous avons démontré que Rab32 favorise la prolifération des cellules T CD8+ effectrices contre des antigènes cellulaires in-vivo. D’une façon intéressante, Rab32 n'affecte pas la présentation croisée par les cDC1s ex-vivo. Nous avons démontré en outre que Rab32 favorise l'infiltration tumorale des cellules T CD8+ spécifiques de l'antigène en favorisant la migration de cDC à partir de la tumeur vers les ganglions lymphatiques drainants. Au niveau intracellulaire, Rab32 régule le positionnement des lysosomes dans les cDC1, pouvant ainsi réguler les fonctions lysosomales. Sur la base de ces observations, nous émettons l'hypothèse que Rab32 favorise la migration des DC vers les ganglions lymphatiques en optimisant la signalisation lysosomale dans ces cellules et impactant ainsi l'activation des cellules T CD8+ contre les antigènes tumoraux.

The conventional type1 Dendritic Cells (cDC1s) efficiently cross-prime CD8+ T cells against cellular antigens derived from necrotic cells, viral-infected or tumour cells in-vivo. This functional specialization results from a combination of cDC1s characteristics, such as the ability to internalise and transport cellular antigens from peripheral tissues to draining lymph nodes, and the unique cross-presentation machinery of cDC1s. Therefore, it is interesting to investigate how cDC1 specific proteins affect their functions. Rab GTPases are the master regulators of intracellular vesicular trafficking and have been shown to promote CD8+ T cell cross-priming in-vivo. The aim of this thesis is to study the role of GTPase Rab32 in optimizing CD8+ T cell cross-priming against cellular antigens by cDC1s. We identify Rab32 to be highly and differentially expressed in splenic cDC1s compared to cDC2s. Using Rab32 deficient mice, we demonstrate that Rab32 promotes the proliferation of effector CD8+ T cells in response to challenge with cellular antigens in-vivo. Interestingly, Rab32 does not affect cross-presentation by cDC1s ex-vivo. We further demonstrate that Rab32 promotes tumour infiltration of antigen-specific CD8+ T cell by promoting the presence of tumour migratory cDCs in the draining lymph nodes. Intracellularly, Rab32 regulates the positioning of lysosomes in cDC1s, which has previously been linked to lysosomal funtions. Based on these observations, we hypothesise that Rab32 promotes DC migration towards lymph lodes by optimising lysosomal signalling in these cells, thus impacting the priming of CD8+ T cells.