Activation plaquettaire induite par les IgG anti-FP4 : mécanismes et conséquences pour la physiopathologie et le diagnostic des thrombopénies induites par l’héparine

Platelet activation induced by anti-PF4 IgG : mechanisms and consequences for the pathogenesis and diagnosis of heparin-induced thrombocytopenia

• Auteur / Autrice : Caroline Vayne
• Direction : Yves Gruel
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences de la vie et de la santé
• Date : Soutenance le 12/06/2020
• Etablissement(s) : Tours
• Ecole(s) doctorale(s) : École doctorale Santé, Sciences Biologiques et Chimie du Vivant (Centre-Val de Loire ; 2012-....)
• Partenaire(s) de recherche : Laboratoire : Groupe Innovation et Ciblage Cellulaire (Tours)
• Jury : Président / Présidente : Eric Reiter
• Jury : Examinateurs / Examinatrices : Véronique Regnault, Jérôme Rollin
• Jury : Rapporteurs / Rapporteuses : Delphine Borgel, Lorenzo Alberio

Mots clés

Mots clés contrôlés

Récepteurs Fc

Anticorps à domaine unique

Cellules immunocompétentes -- Activation

Autoimmunité

Immunoglobuline G

Héparines

Physiopathologie

Anticorps monoclonaux

Diagnostic

Thrombocytopénie

Activation plaquettaire

Mots clés libres

Thrombopénie

Héparine

Facteur plaquettaire 4

Thrombocytopenia

Heparin

Platelet factor 4

Antibodies

Diagnosis

Autoimmunity

Résumé

Les thrombopénies induites par l’héparine (TIH) sont une complication sévère des traitements hépariniques, le plus souvent dues au développement d’anticorps dirigés contre le facteur 4 plaquettaire modifié par l’héparine (anti-FP4/H), responsables d’une activation multicellulaire et de thromboses. Nous avons caractérisé l’anticorps 5B9, une IgG1 monoclonale chimérique anti-FP4/H mimant les anticorps de TIH. En utilisant cet outil, nous avons montré que les concentrations de FP4 dans l’environnement cellulaire influençaient la capacité des anticorps de TIH à activer les plaquettes et développé un test fonctionnel sensibilisé par l’ajout de FP4 pour le diagnostic des TIH.Les anticorps dirigés contre le FP4 sont très hétérogènes, et ceci est illustré par le concept de TIH « auto-immune ». Cette forme rare de TIH est associée à la présence conjointe d’anticorps anti-FP4/H et d’anticorps atypiques, reconnaissant le FP4 natif (anti-FP4) avec une forte affinité, et activant les plaquettes en l’absence d’héparine. Nous avons caractérisé 3 anticorps monoclonaux chimériques, 1C12, 1E12 et 2E1, qui miment ces anticorps atypiques. Grâce à eux, nous avons démontré l’existence d’une synergie entre les anticorps anti-FP4/H et anti-FP4 en termes d’activation cellulaire, même en l’absence d’héparine.

Heparin-induced thrombocytopenia (HIT) is a severe complication of heparin treatment, mainly due to the development of antibodies against platelet factor 4 modified by heparin (anti-FP4/H) responsible for multicellular activation and thrombosis. We characterized 5B9, a monoclonal chimeric anti-PF4/H IgG1 mimicking HIT antibodies. Using this tool, we then showed that concentrations of PF4 in the cellular environment influenced the ability of HIT antibodies to activate platelets, thereby allowing us to develop a sensitized PF4-based functional assay for HIT diagnosis.Antibodies directed against PF4 are highly heterogeneous, this being perfectly illustrated by ''autoimmune'' HIT. This unusual presentation of HIT is associated with the presence of both anti-PF4/H antibodies and atypical antibodies that recognize native PF4 (anti-PF4) with high affinity, and activate platelets without heparin. We characterized 3 chimeric monoclonal antibodies, 1C12, 1E12 and 2E1, which mimic atypical HIT antibodies, and then demonstrated a synergy between anti-PF4/H and anti-PF4 antibodies with respect to cell activation, even without heparin.