Etude du rétrotransposon SD' du rétrovirus leucémogène MLV

Study of the retrotransposon SD' of the leukemogenic retrovirus MLV

• Auteur / Autrice : Charbel Akkawi
• Direction : Marylène Mougel
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Biologie Santé
• Date : Soutenance le 14/09/2020
• Etablissement(s) : Montpellier
• Ecole(s) doctorale(s) : Sciences Chimiques et Biologiques pour la Santé
• Partenaire(s) de recherche : Laboratoire : Institut de Recherche en Infectiologie de Montpellier (Montpellier)
• Jury : Examinateurs / Examinatrices : Marylène Mougel, Delphine Sitterlin, Philippe Fossé, Sébastien Lainé, Céline Verheggen
• Jury : Rapporteurs / Rapporteuses : Delphine Sitterlin, Philippe Fossé

Mots clés

Mots clés contrôlés

Leucémie

Rétroviridés

Virus de la leucémie murine

Mots clés libres

Sd'

Mlv

Retrovirus

Cancerologie

Leucemie

P50

Sd'

Mlv

Retrovirus

Cancerologie

Leukemia

P50

Résumé

Le virus de la Leucémie murine (MLV) appartient à la sous-famille des onco-rétrovirus simples qui se distingue par une organisation génétique élémentaire contenant les gènes gag, pol et env codant respectivement les protéines structurales, les enzymes (protéase, transcriptase inverse, et intégrase) et les protéines d'enveloppe (SU et TM), le tout encadré par les séquences régulatrices LTR (Long Terminal Repeats). MLV est largement utilisé comme vecteurs de gènes en thérapie génique. Il constitue également un modèle intéressant pour l'étude de la leucémogénèse. En effet, bien qu'il ne porte pas de proto-oncogène au sein de son propre génome, MLV induit des tumeurs T-lymphoïdes chez la souris suite à la mutagenèse insertionnelle induite par son intégration dans le génome de l'hôte. Ceci en fait un système modèle pour la leucémogénèse largement étudié aux niveaux moléculaire et cellulaire. En 2003, notre équipe a identifié un nouvel ARNm chez MLV, nommé ARN SD', issu d'un épissage alternatif qui est requis pour une réplication optimale du virus. Cet ARN SD' qui a la particularité d'être encapsidé dans les néo-virions, code pour une polyprotéine de 50 kDa (P50) composée de la partie N-terminale de la protéine Gag et de la partie C-terminale de l'intégrase. Mes travaux de thèse ont porté sur le rôle de P50 dans la cancerogénese. J'ai étudié les mécanismes impliqués dans l'encapsidation des ARN génomiques et SD' du MLV, ainsi que l’effet oncogénique de la protéine P50 sur les cellules murines. Nos études ont ainsi pu montrer que le devenir des ARN du MLV dépend de la voie d'export nucléaire utilisée. Nous avons ainsi démontré pour la première fois le rôle de P50 dans la prolifération cellulaire, la perte d'inhibition de contact et l'inhibition de l'apoptose. Nous avons également mis en évidence l’activité transrégulatrice de P50 sur les promoteurs des gènes viraux ainsi que des proto-oncogènes cellulaires.Mots-clés : Rétrovirus, MLV, SD’, Cancérogenèses, prolifération, apoptose

The Murine Leukemia Virus (MLV) belongs to the sub-family of simple oncoretroviruses which is distinguished by a basic genetic organization containing the gag, pol and env genes encoding respectively structural proteins of the virus, enzymes (reverse transcriptase, integrase and protease) and the regulatory envelope proteins (SU and TM), all framed by the LTR (Long Terminal Repeats) regulatory sequences. MLV is widely used as gene vectors in gene therapy. It is also an interesting model for the study of leukemogenesis. Indeed, although it does not carry a proto-oncogene within its own genome, MLV induces T-lymphoid tumors in mice following insertional mutagenesis induced by its integration into the host genome. This makes it a model system for leukemogenesis that is widely studied at the molecular and cellular level. In 2003, our team identified a new mRNA at MLV, named SD' RNA, derived from alternative splicing which is required for optimal virus replication. This SD' RNA, which has the particularity of being packaged in neo-virions, codes for a 50 kDa polyprotein (P50) composed of the N-terminal part of the Gag protein and the C-terminal part of the integrase. My thesis work focused on the role of P50 in cancerogenesis. I studied the mechanisms involved in the encapsidation of genomic RNA and SD' of MLV, as well as the oncogenic effect of P50 on mouse cells. Our studies have shown that the fate of MLV RNAs depends on the nuclear export pathway used. We thus showed for the first time the role of P50 in cell proliferation, loss of contact inhibition and inhibition of apoptosis. We have also demonstrated a transregulatory activity of P50 on promoters of viral gene and cellular proto-oncogenes.Keywords : Retroviruses, MLV, SD', Carcinogenesis, proliferation, apoptosis