Thèse soutenue

Cartographie et fonctions des fragments issus du facteur de guidage axonal Slit
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Auteur / Autrice : Thibault Gardette
Direction : Servane Delamasure
Type : Thèse de doctorat
Discipline(s) : Neurodéveloppement
Date : Soutenance le 30/06/2020
Etablissement(s) : Lyon
Ecole(s) doctorale(s) : École Doctorale de Biologie Moléculaire Intégrative et Cellulaire (Lyon)
Partenaire(s) de recherche : établissement opérateur d'inscription : Université Claude Bernard (Lyon ; 1971-....)
Laboratoire : Institut NeuroMyoGène (Lyon ; 2016-2021)
Jury : Président / Présidente : Bénédicte Durand
Examinateurs / Examinatrices : Servane Delamasure, Jean-Loup Duband, Isabelle Dusart, Olivier Raineteau, Homaira Nawabi
Rapporteurs / Rapporteuses : Jean-Loup Duband, Isabelle Dusart

Mots clés

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Résumé

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Différentes forces d’attraction et de répulsions contrôlent la navigation des axones commissuraux à travers la ligne médiane de la moelle épinière. Lors de leur traversée de la plaque du plancher, les axones commissuraux deviennent sensibles aux signaux répulsifs Slit1-3. Cette sensibilisation est nécessaire pour empêcher les axones de faire demi-tour et pour les expulser de la plaque du plancher. Cependant, la structure même de la plaque du plancher est encore peu connue. En effet, les cellules gliales composant la plaque du plancher sont encore représentées comme de simples cellules bipolaires avec deux prolongements : un apical et un basal. En utilisant des reconstructions 3D, nous avons pu illustrer qu’une unique cellule gliale possède en réalité de multiples pieds basaux à la géométrie complexe, laissant ainsi peu d’espace pour les axones. Cette forme semble pouvoir aider physiquement à guider la navigation des axones. De plus, nous avons étudier le rôle fonctionnel de différents répulsifs. Les Slit sont clivés par une protéase encore inconnue, ce qui donne deux fragments : SlitN et SlitC, respectivement actifs via les récepteurs Robo1/2 et PlexinA1. Nous avons généré une lignée murine, PlexinA1Y1815F, en mutant le résidu Tyrosine 1815 dont la phosphorylation est requise in vitro pour la signalisation SlitC (Delloye-Bourgeois et al., 2015). Notre analyse phénotypique montre que la signalisation SlitC/PlexinA1 est 1) nécessaire pour empêcher les demi-tours d’axones commissuraux, et 2) dispensable pour les autres aspects de la navigation dans la plaque du plancher. Enfin, grâce à des rapporteurs fluorescents exprimés spécifiquement dans la plaque du plancher, nous avons étudié les dynamiques de la protéine Slit2. Nos résultats montrent que les fragments diffuse depuis de compartimentalisation du trajet des axones. Nos résultats montrent que les fragments diffusent depuis les corps cellulaires jusqu’au domaine basal. Cependant, l’expression de SlitN et SlitC ne se chevauche pas dans le domaine basal. De plus, nous montrons que le clivage de Slit2 est essentiel pour la distribution des fragments. En conclusion, mon travail révèle l’importance des processus post-transcriptionnels pour le guidage axonal grâce à des mécanismes visant ligands et récepteurs