Thèse soutenue

Les vésicules extracellulaires : un outil de choix pour l'étude des protéines membranaires
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Auteur / Autrice : Vincent Delauzun
Direction : Alain RousselBéatrice Amigues
Type : Thèse de doctorat
Discipline(s) : Biochimie structurale et génomique
Date : Soutenance le 16/12/2020
Etablissement(s) : Aix-Marseille
Ecole(s) doctorale(s) : Ecole Doctorale Sciences de la Vie et de la Santé (Marseille)
Partenaire(s) de recherche : Laboratoire : Architecture et Fonction des Macromolécules Biologiques (AFMB) (Marseille)
Jury : Président / Présidente : Bruno Coutard
Examinateurs / Examinatrices : Laurent Gauthier, Christine Kellenberger
Rapporteurs / Rapporteuses : Anass Jawhari, Isabelle Broutin

Résumé

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Les protéines membranaires (PMs) présentes à la surface des cellules vivantes font partie d'une classe centrale du protéome cellulaire. Elles sont impliquées dans de nombreux processus biologiques tels que les infections virales ou la réponse immunitaire cellulaire. Produire ces protéines est une tâche difficile en raison de leur instabilité une fois extraites de leur membrane d’origine. La plupart des procédés impliquent la purification de ces protéines dans un détergent et leur stabilisation dans des environnements artificiels. Ces méthodes couteuses et chronophages ne permettent pas toujours de conserver l’architecture naturelle de ces protéines.Les cellules eucaryotes ont la capacité de produire des vésicules extracellulaires (VEs). Elles constituent de véritables voies de communication intercellulaire et suscitent actuellement un véritable engouement de la part de la communauté scientifique. Afin de tester l’apport de l’utilisation des VEs dans l’étude des PMs, nous avons développé un procédé permettant d'obtenir rapidement ces PMs surexprimées à la surface de VEs produites à partir de cellules de mammifère. Cette méthode a d'abord été mise au point et validée sur la glycoprotéine de l’enveloppe du virus Ébola, puis étendue à d'autres types de PMs tel que l’enzyme humaine CD73. Enfin, les VEs ont été utilisées pour la génération et la sélection d’anticorps de camélidés contre la glycoprotéine B de l’enveloppe du virus de l’herpès. D'après l’ensemble de ces résultats, les VEs semblent définitivement être un outil avantageux pour l’obtention, le stockage et l'utilisation des PMs dans un environnement aussi proche que possible de leur état naturel.