La protease Nexine-1, une cible prometteuse dans le traitement de l'hémophilie et son rôle dans les polynucléaires neutrophiles

Protease Nexin-1, a promising therapeutic target for hemophilia and its functions in neutrophils

• Auteur / Autrice : Karen Aymonnier
• Direction : Marie-Christine Bouton
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Médecine. Hématologie
• Date : Soutenance le 25/06/2019
• Etablissement(s) : Sorbonne Paris Cité
• Ecole(s) doctorale(s) : École doctorale Hématologie, oncogenèse et biothérapies (Paris ; 2014-....)
• Partenaire(s) de recherche : Equipe de recherche : Laboratoire de recherche vasculaire translationnelle (Paris ; 2014-....)
• Partenaire(s) de recherche : établissement de préparation : Université Paris Diderot - Paris 7 (1970-2019)
• Jury : Président / Présidente : Nadine Ajzenberg
• Jury : Examinateurs / Examinatrices : Marie-Christine Bouton, Nadine Ajzenberg, Delphine Borgel, Charaf Benarafa, Yohann Repessé, Pham My-Chan Dang
• Jury : Rapporteur / Rapporteuse : Delphine Borgel, Charaf Benarafa

Mots clés

Mots clés contrôlés

Facteur VIII

Serpine E2

Inflammation

Neutrophiles

Coagulation du sang

Hémophilie A

Serpines

Mots clés libres

Protéase nexine-1

Protease Nexin-1

Résumé

L’hémophilie A est une maladie hémorragique rare caractérisée par un déficit du facteur de la coagulation VIII (FVIII). De nouvelles stratégies thérapeutiques ne reposant pas sur l’injection de FVIII se développent. Nous proposons une approche innovante qui consiste à cibler un anticoagulant naturel présent dans les plaquettes, la Protéase Nexine-1 (PN-1). La PN-1 est un inhibiteur puissant de la thrombine, enzyme clé de la coagulation. Bloquer la PN-1 favoriserait ainsi la génération de thrombine et donc la coagulation chez les patients hémophiles. Nous avons montré que bloquer la PN-1 améliore effectivement la génération de thrombine dans les plasmas de patients hémophiles. Nos données obtenues in vivo ont également montré une restauration de la coagulation et des temps de saignement chez des souris hémophiles déficientes en PN-1. L’ensemble de nos résultats indique que la PN-1 constitue une nouvelle cible thérapeutique intéressante pour le traitement de l’hémophilie.Le rôle potentiel de la PN-1 dans la régulation des mécanismes inflammatoires n’est pas connu. Au niveau des cellules inflammatoires, sa présence n’a été démontrée que dans les monocytes-macrophages et son expression n’a encore jamais été étudiée dans les polynucléaires neutrophiles. Nous avons ainsi mis en évidence pour la première fois la présence de PN-1 dans les neutrophiles et avons montré que le déficit en PN-1 limite le recrutement des neutrophiles in vivo. Ces travaux ont permis d’identifier la PN-1 comme un nouveau régulateur des mécanismes de recrutement des neutrophiles.

Hemophilia is a disease caused by the lack of Factor VIII (FVIII), leading to insufficient thrombin production, and therefore bleeding. Recently, new therapeutic strategies for hemophilia treatment, that do not rely on clotting factor replacement, have emerged. We propose an innovative approach consisting in targeting a natural and potent thrombin inhibitor, expressed by platelets and called protease nexin-1 (PN-1). Our results demonstrated that blocking PN-1 increased, in vitro, thrombin generation in plasma from patients with hemophilia, and reduced blood loss in hemophiliac mice. Our study provides proof-of-concept that PN-1 neutralizing can be a a novel approach for future clinical care in hemophilia. The potential role of PN-1 in regulating inflammatory processes is not known. Vascular cells, platelets and inflammatory cells express PN-1, but no data are available concerning its expression and potential function in neutrophils. For the first time, we demonstrated the presence of PN-1 in neutrophils. Our data have shown that neutrophil recruitment was much less important in peritoneal cavity of PN-1-/- mice than in those of WT mice. These novel findings suggest that PN-1 is a serpin regulating positively PMNs functions.