Etude d'une thérapie cellulaire par transplantation intrapulmonaire de macrophages dans le traitement d'une infection aigue à pseudomonas aeruginosa

Intrapulmonary transfer of macrophages in the treatment of Pseudomonas aeruginosa acute infections

• Auteur / Autrice : Saadé Kheir
• Direction : Jean-Michel Sallenave
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Immunologie
• Date : Soutenance le 30/09/2019
• Etablissement(s) : Université Paris Cité
• Ecole(s) doctorale(s) : École doctorale BioScience Paris Cité (Paris ; 2014-....)
• Partenaire(s) de recherche : Equipe de recherche : Physiopathologie et Epidémiologie des Maladies Respiratoires (Paris ; 2014-....)
• Jury : Président / Présidente : Antonino Nicoletti
• Jury : Examinateurs / Examinatrices : Jean-Michel Sallenave, Antonino Nicoletti, Jean-Claude Lecron, Bernhard Ryffel, Florence Niedergang, Corinne Chouly-Martin
• Jury : Rapporteurs / Rapporteuses : Jean-Claude Lecron, Bernhard Ryffel
• DOI : 10.70675/c75a06a7zc23ez44efza749z7c20bd04df28

Mots clés

Mots clés contrôlés

Pseudomonas aeruginosa

Infections à Pseudomonas aeruginosa

Inflammation

Thérapeutique cellulaire

Macrophages alvéolaires

Immunité innée

physiologie

Interleukine-6

Mots clés libres

Résolution et réparation

Transplantation intrapulmonaire

Resolution and repair

Intrapulmonary transfer

Résumé

Pseudomonas aeruginosa (P.a) est un bacille Gram négatif responsable d’infections chroniques associées à une mortalité élevée due à la prédilection de la bactérie à développer une résistance aux antibiotiques et l’inefficacité des thérapies actuelles. Notre groupe a montré dans un modèle d’infection aigue chez la souris, que l’élastase B (LasB), un facteur de virulence de P.a, dégrade la cytokine IL-6 et la molécule antimicrobienne Elafine et que la surexpression de ces deux médiateurs confère une protection aux souris en diminuant l’inflammation et augmentant la réparation. Les macrophages alvéolaires représentent la population myéloïde la plus abondante dans l’espace alvéolaire et jouent un rôle clé dans le maintien de l’homéostasie, l’initiation & la résolution de l’inflammation. Compte tenu de leur importance, ils sont très étudiés dans le cadre de développement de nouvelles approches de thérapie cellulaire. Nous avons donc émis l’hypothèse que le macrophage alvéolaire qui est également cible de P.a et de LasB plus particulièrement, puisse être un outil adéquat pour le transfert de la protection IL-6- et Elafine-médiée. L’objectif principal de ce travail est de modifier le macrophage avec des vecteurs adénoviraux permettant la surexpression de l’IL-6 et de l’Elafine, et de l’utiliser comme un outil thérapeutique dans un modèle de transplantation intrapulmonaire suivie d’une infection par P.a. Nous montrons que le transfert de macrophages génétiquement modifiés avec l’IL-6 et l’Elafine est protecteur. L’Elafine induit dans le macrophage une signature IL6/IL10/peptides antimicrobiens qui, en synergie avec l’IL-6, confère un phénotype régulateur à l’unité alvéolaire

Pseudomonas aeruginosa (P.a) is a Gram-negative bacillus responsible for chronic infections associated with high mortality due to the bacterium's predilection for developing antibiotic resistance and the inefficacy of current therapies. Our group showed in a model of acute infection in mice that Elastase B (LasB), a virulence factor of Pa, degrades the cytokine IL-6 and the antimicrobial molecule Elafine and that the overexpression of these two mediators provides protection to mice by decreasing inflammation and increasing repair. Alveolar macrophages represent the most abundant myeloid population in the alveolar space and play a key role in maintaining homeostasis, initiation and resolution of inflammation. Given their importance, they are very much studied in the development of new approaches to cell therapy. We therefore hypothesized that the alveolar macrophage which is also targeted by P.a and LasB more particularly, may be an adequate tool for the transfer of IL-6- and Elafine-mediated protection. The main objective of this work is to modify the macrophage with adenoviral vectors allowing the overexpression of IL-6 and Elafine, and to use it as a therapeutic tool in an intrapulmonary transplantation model followed by a Pa infection We show that the transfer of genetically modified macrophages with IL-6 and Elafine is protective. Elafine induces in the macrophage an IL6 / IL10 / antimicrobial peptide signature which, in synergy with IL-6, confers a regulatory phenotype to the alveolar unit.