Analyse des sous-populations lymphocytaires B dans la leucémie lymphoïde chronique et de l'Impact de l'ibrutinib sur ces sous-populations

Analysis of immunoregulatory CD5⁺CD19⁺ subpopulations in chronic lymphocytic leukemia and of the impact of ibrutinib therapy on these subpopulations

• Auteur / Autrice : Anne Quinquenel
• Direction : Nadine Varin-Blank, Christine Le Roy
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Biologie cellulaire et moléculaire
• Date : Soutenance le 09/03/2018
• Etablissement(s) : Sorbonne Paris Cité
• Ecole(s) doctorale(s) : École doctorale Galilée (Villetaneuse, Seine-Saint-Denis)
• Partenaire(s) de recherche : Etablissement de préparation : Université Sorbonne Paris Nord (Bobigny, Villetaneuse, Seine-Saint-Denis ; 1970-....)
• Partenaire(s) de recherche : Laboratoire : Laboratoire Adaptateurs de signalisation en hématologie (Bobigny)
• Jury : Président / Présidente : Alain Delmer
• Jury : Examinateurs / Examinatrices : Anne-Sophie Michallet
• Jury : Rapporteurs / Rapporteuses : Sophie Raynaud, Christophe Jamin

Mots clés

Mots clés contrôlés

Récepteurs CXCR4

Interleukine 10

Leucémie lymphoïde chronique

Mots clés libres

Lymphocyte B régulateur

Ibrutinib

Résumé

La leucémie lymphoïde chronique (LLC) est une hémopathie B qui se caractérise par une évolution clinique hétérogène et un dysfonctionnement du système immunitaire. Des travaux antérieurs du laboratoire ont mis en évidence l’existence de sous-populations lymphocytaires B CD5⁺/CD19⁺ qui sécrètent des facteurs solubles immuno-régulateurs, tels que l’IL10 et le TGFβ1 et, qui expriment le facteur de transcription FOXP3. Mon travail de thèse a consisté à poursuivre la caractérisation phénotypique et fonctionnelle de ces sous populations,et notamment celle sécrétant de l’IL10, tout en évaluant son évolution chez des patients en cours de traitement par ibrutinib, un inhibiteur de Btk. Sur le plan fonctionnel,mes travaux démontrent que les lymphocytes B de LLC ont la capacité d’inhiber la prolifération lymphocytaire T CD4⁺, d’induire une différenciation lymphocytaire T régulatrice et d’inhiber la différenciation Th1. Mes résultats démontrent également que la sous population IL10⁺ présente des caractéristiques phénotypiques et d’activation communes aux cellules de la fraction proliférative. De plus, la fréquence de la population IL10⁺, plus élevée chez les patients évolutifs, révèle que la capacité de sécrétion de l’IL10 par les cellules B de LLC est corrélée à la progression. Enfin, le traitement par ibrutinib induit une diminution rapide de la sous-population IL10+ qui se comporte comme celle de la sous-population CXCR4ˡᴼᵂ, un marqueur de la fraction proliférative. L’ensemble de ces données souligne l’importance des sous-populations immuno-régulatrices dans l’évolutivité de la LLC et apporte de nouveaux éléments sur les mécanismes d’action de l’ibrutinib.

Chronic lymphocytic leukemia (CLL) is a chronic lymphoproliferative disorder characterized by a heterogeneous clinical evolution, with indolent and progressive forms, as well as by analtered immune system; the latter being consistently found during disease progression. Our laboratory has previously demonstrated the existence of clonal CD5⁺/CD19⁺ subpopulations that secrete soluble cytokines, such as IL10 and TGFβ1, and express the transcription factor FOXP3. Based on these results, my work aimed to further characterize phenotypically and functionally these subpopulations, and notably the IL10 secreting one and to by follow its evolution during therapy with ibrutinib, a Btk inhibitor. Functionally, my results demonstrate that CD5⁺ CD19⁺ B lymphocytes have the ability to inhibit CD4⁺ T cells proliferation, to induce regulatory T cells differentiation and to reduce Th1 differentiation. Moreover, we also evidenced that IL10 producing subpopulation shares common phenotypic and activation features with the CLL cells that are part of the proliferative fraction. Furthermore, the higher frequency of the IL-10⁺ found in progressive patients compared to the indolent ones reveals that IL10 secretion by CLL B cells is linked to disease progression. Finally, Ibrutinib therapy induced a rapid decrease of the absolute number of IL10⁺ cells, which behave like the cells expressing low levels of the CXCR4, a marker of the proliferative fraction. Altogether, our results highlight the crucial role of the immunoregulatory CD5⁺/CD19⁺ subpopulations in CLL progression, and provide new clues on the mechanisms underlying the therapeutic effects of ibrutinib.