Déficit fonctionnel sévère en ADAMTS13 (protéase spécifique de clivage du facteur Willebrand) : physiopathologie du purpura thrombotique thrombocytopénique de l’enfant

Severe functional deficiency of ADAMTS13 (von Willebrand factor-cleaving protease) : pathophysiology of child-onset thrombotic thrombocytopenic purpura

• Auteur / Autrice : Bérangère Joly
• Direction : Agnès Veyradier
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Médecine. Hématologie
• Date : Soutenance le 17/12/2018
• Etablissement(s) : Sorbonne Paris Cité
• Ecole(s) doctorale(s) : École doctorale Hématologie, oncogenèse et biothérapies (Paris ; 2014-....)
• Partenaire(s) de recherche : Equipe de recherche : Recherche clinique appliquée à l'hématologie (Paris ; 2009-2024)
• Partenaire(s) de recherche : établissement de préparation : Université Paris Diderot - Paris 7 (1970-2019)
• Jury : Président / Présidente : Paul Coppo
• Jury : Examinateurs / Examinatrices : Agnès Veyradier, Paul Coppo, Cécile Denis, Ygal Benhamou, Régis Peffault de Latour, Thierry Leblanc
• Jury : Rapporteurs / Rapporteuses : Cécile Denis, Ygal Benhamou

Mots clés

Mots clés contrôlés

Conformation des protéines

Variation génétique

Facteur de von Willebrand

Protéine ADAMTS13

Purpura thrombotique thrombocytopénique

Microangiopathies thrombotiques

Protéines -- Conformation

Variabilité génétique

Anticorps

Pédiatrie

Facteur de von Willebrand

Purpura thrombotique thrombocytopénique

Mots clés libres

Anticorps anti-ADAMTS13

Anti-ADAMTS13 antibodies

Résumé

Le purpura thrombotique thrombocytopénique (PTT) est défini par un déficit sévère en ADAMTS13, la protéase de clivage du facteur Willebrand (VWF). Physiologiquement, ADAMTS13 adopte une conformation fermée maintenue par une interaction entre son domaine spacer et ses domaines CUB. La liaison du VWF permet une activation allostérique d’ADAMTS13 (conformation ouverte) et une protéolyse du VWF. Le PTT pédiatrique est une entité rare au sein d’une maladie rare (~10% des cas de PTT). La première partie de ce travail a permis de caractériser la cohorte pédiatrique française de PTT. Dans la forme acquise du PTT (~2/3 des cas), nous rapportons une prédominance féminine, une présentation clinique inaugurale idiopathique (IgG anti-ADAMTS13) ou secondaire, et une errance diagnostique dans 30% des cas. Le suivi à long terme de la maladie est crucial pour anticiper une rechute ou une maladie auto-immune. Dans la forme congénitale du PTT (~1/3 des cas), nous avons défini 2 entités distinctes en fonction de l’âge. La confrontation phénotype/génotype est délicate car la majorité des patients sont hétérozygotes composites pour les mutations d’ADAMTS13.La seconde partie de ce travail, dédiée à l’étude de la conformation d’ADAMTS13 grâce au développement d’un ELISA innovant, montre qu’une conformation ouverte d’ADAMTS13 est spécifique de la forme acquise de PTT à la phase aiguë. En rémission, ADAMTS13 adopte le plus souvent une conformation fermée. Les mutations du gène ADAMTS13 sont responsables de plusieurs profils de conformation d’ADAMTS13 dans le PTT congénital. Ces résultats prometteurs doivent être explorés sur un plus grand effectif de patients, et validés par des modèles in vitro.

Thrombotic thrombocytopenic purpura (TTP) is defined by a severe ADAMTS13 deficiency, the specific von Willebrand factor (VWF)-cleaving protease. ADAMTS13 adopts a folded conformation by a spacer-CUB domain interaction, relieved by interaction of ADAMTS13 with its substrate VWF. Child-onset TTP is a rare entity within a rare disease (~10% of all TTP cases).The first part of this work characterizes the French cohort of child-onset TTP. In acquired TTP (~2/3 of cases), we report a sex ratio of 2F/1M, a first TTP episode with either an idiopathic (anti-ADAMTS13 IgG) or a secondary presentation, and a misdiagnosis in 30% of cases. Long-term follow-up is crucial to prevent relapses or the occurrence of an auto-immune disease. In congenital TTP (~1/3 of cases), we have reported that age-onset defines two entities of the disease. The correlation between clinical/biological phenotype and ADAMTS13 genotype is difficult to establish considering heterozygous composite sequence variations of ADAMTS13 gene.The second part of this work, dedicated to the study of ADAMTS13 conformation in TTP using a newly developed innovating ELISA, reports that an open conformation of ADAMTS13 is specific of the acute phase of acquired TTP in both children and adults. During remission, ADAMTS13 adopts a folded conformation in most cases. Sequence variations of ADAMTS13 gene are responsible of several conformation profiles in congenital TTP. These results are promising but should be explored in more patients, and validated by in vitro models