Thèse soutenue

ExoY, une toxine nucléotidyl cyclase de Pseudomonas aeruginosa
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Auteur / Autrice : Alexander Belyy
Direction : Undine Mechold
Type : Thèse de doctorat
Discipline(s) : Aspects moléculaires et cellulaires de la biologie. Microbiologie
Date : Soutenance le 17/09/2018
Etablissement(s) : Sorbonne Paris Cité
Ecole(s) doctorale(s) : École doctorale Bio Sorbonne Paris Cité (Paris ; 2014-....)
Partenaire(s) de recherche : Laboratoire : Unité Biochimie des interactions macromoléculaires (Paris)
établissement de préparation : Université Paris Diderot - Paris 7 (1970-2019)
Jury : Président / Présidente : Claudine Mayer
Examinateurs / Examinatrices : Undine Mechold, Claudine Mayer, Holger Barth, Ina Attree-Delic, Louis Renault, Michel-Robert Popoff
Rapporteurs / Rapporteuses : Holger Barth, Ina Attree-Delic

Mots clés

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Mots clés contrôlés

Mots clés libres

Résumé

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Les toxines bactériennes de nucléotidyl cyclase sont de puissants facteurs de virulence capables d'envahir les cellules eucaryotes lorsqu'elles sont activées par des cofacteurs endogènes pour produire de grandes quantités de monophosphates nucléosidiques 3'5'-cycliques. Nous avons trouvé que l'activité de ExoY effecteur de Pseudomonas aeruginosa est stimulée par la forme filamenteuse de l'actine (F-actine). L'association avec la F-actine augmente l'activité ExoY de plus de 10 000 fois in vitro et favorise la stabilisation des filaments d'actine. Ensuite, en utilisant l'analyse du phénotype de la levure, la mutagenèse dirigée, les dosages biochimiques fonctionnels et la microscopie confocale, nous avons caractérisé l'interaction ExoY-F-actine. Nous avons trouvé que Asp25 de l'actine et l'extrémité C-terminale de ExoY sont cruciales pour l'activité enzymatique ExoY in vitro et la toxicité dans un modèle de levure. Cette étude fournit le premier aperçu des détails structuraux de l'interaction ExoY-F-actine.