Anticorps anti-FP4/héparine et protéases : nouvelles stratégies thérapeutiques dans les thrombopénies induites par l'héparine

Anti-PF4/heparin antibodies and proteasis : new therapeutic strategies for heparin-induced thrombocytopenia

• Auteur / Autrice : Claire Kizlik-Masson
• Direction : Claire Pouplard
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences de la vie et de la santé
• Date : Soutenance le 14/12/2018
• Etablissement(s) : Tours
• Ecole(s) doctorale(s) : École doctorale Santé, Sciences Biologiques et Chimie du Vivant (Centre-Val de Loire ; 2012-....)
• Partenaire(s) de recherche : Equipe de recherche : Groupe Innovation et Ciblage Cellulaire (Tours)
• Jury : Président / Présidente : Marie-Claude Viaud-Massuard
• Jury : Examinateurs / Examinatrices : Sylvain Marchand-Adam, Pierre Martineau, Vincent Lisowski, Jérôme Rollin
• Jury : Rapporteur / Rapporteuse : Thomas Lecompte, Martine Jandrot-Perrus

Mots clés

Mots clés contrôlés

Anticorps

Conjugués anticorps-médicament

Récepteurs Fc

Protéases

Héparines

Thrombocytopénie

Mots clés libres

Thrombopénie induite par l’Héparine

FcγR

Anticorps

Protéases

IdeS

Antithrombotique Antibody- Drug Conjugate

Heparin-Induced Thrombocytopenia

FcγR

Antibody

Proteases

IdeS

Antithrombotic Antibody- Drug Conjugate (ADC)

Résumé

Les Thrombopénies Induites par l’Héparine (TIH) sont une complication sévère des traitements par l’héparine dues à des IgG qui ciblent le facteur plaquettaire 4 modifié par l’héparine (FP4/H) et induisent une activation cellulaire via FcγRIIA, conduisant à des complications thrombotiques. Nous avons caractérisé 5B9, IgG1 monoclonale chimérique anti-FP4/H mimant parfaitement les anticorps de TIH et qui est donc un excellent outil pour étudier la physiopathologie des TIH. La pathogénicité des anticorps (Ac) de TIH implique leur fixation aux FcγR. Nous avons montré que le clivage de la région charnière des IgG de TIH par IdeS inhibe ces interactions IgG-FcγR et supprime la pathogénicité des Ac. Nous avons aussi construit un Antibody-Drug Conjugate (ADC) antithrombotique, en bioconjuguant le tirofiban (inhibiteur de l’agrégation plaquettaire) et 5B9 déglycosylé grâce à un linker clivable par la thrombine, protéase générée en excès lors d’une TIH.

Heparin Induced Thrombocytopenia (HIT) is a rare but severe complication of heparin treatments. HIT is due to IgG antibodies specific to platelet factor 4 modified by heparin (PF4/H), which activate blood cells, (especially platelets) after binding to FcγRIIA, this process explaining frequent thrombotic complications. We characterized 5B9, a chimeric IgG1 targeting PF4/H and which fully mimics human HIT antibodies. Therefore, 5B9 is a perfect tool for studying the physiopathology of HIT. IgG antibodies to PF4/H are pathogenic by interacting with FcγR. In this regard, we showed that cleavage by IdeS, a bacterial protease, of the hinge of anti-PF4/H IgG, fully suppressed their pathogenicity. Furthermore, we designed an antithrombotic Antibody-Drug Conjugate that combined tirofiban, a GPIIbIIIa inhibitor with deglycosylated 5B9 using a thrombin cleavable linker.