Nouvelles approches diagnostiques de la Trypanosomiase Américaine

New diagnostic approaches to American Trypanosomiasis

• Auteur / Autrice : Jean-Yves Brossas
• Direction : Dominique Mazier, Angelita Rebollo
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Immunologie
• Date : Soutenance le 28/11/2018
• Etablissement(s) : Sorbonne université
• Ecole(s) doctorale(s) : École doctorale Complexité du vivant (Paris ; 2009-....)
• Partenaire(s) de recherche : Laboratoire : Centre d'immunologie et des maladies infectieuses (Paris ; 2014-....)
• Jury : Président / Présidente : Renaud Piarroux
• Jury : Examinateurs / Examinatrices : Margarita Catalina Bisio, Pierre Verhaeghe, Harold Noël
• Jury : Rapporteurs / Rapporteuses : Eric Châtelain, Philippe Grellier

Mots clés

Mots clés contrôlés

Spectrométrie de masse

Marqueurs biologiques

Diagnostic

Trypanosomiase américaine

Mots clés libres

Trypanosoma cruzi

Maladie de Chagas

Trypanosomiase américaine

Diagnostic

Biomarqueur

Spectrométrie de masse

Trypanosoma cruzi

Chagas disease

Diagnostic

Résumé

La maladie de Chagas affecte six à huit personnes dans le monde. Depuis quelques décennies, cette pathologie se diffuse hors de sa zone d’endémie, l’Amérique latine. Cette infection présente de grandes difficultés tant pour le diagnostic que pour le traitement. Malgré les avancées importantes de ces dernières années, l'amélioration du diagnostic reste un défi majeur dans la prise en charge des patients atteints de Trypanosomiase Américaine. Dans une première partie, nous présentons nos études sur le développement d'un nouveau test de diagnostic basé sur l'identification directe d'antigènes parasitaires présents dans le sérum. Nous avons analysé le surnageant de culture de cellules infectées par T. cruzi par spectrométrie de masse et nous avons identifié une protéase parasitaire, la Chagasin, qui pourrait être un marqueur sérique de l’infection à T. cruzi. Dans une deuxième partie, nous présentons une étude permettant d’interpréter et d’évaluer un nouveau test diagnostic ''Western Chagas IgG'' fabriqué, à partir d’extraits protéique de T. cruzi, conjointement par la société LDBIO Diagnostics (Lyon, France) et le laboratoire de parasitologie et de mycologie de l'hôpital Pitié Salpétrière. Les résultats de cette étude montrent que les valeurs de sensibilité et de spécificité de ce test sont proches de 100%. Nous considérons que l'immunoblot ''Western Chagas IgG''est un excellent test diagnostic de confirmation de la maladie de Chagas et destiné à la vérification de résultats équivoques obtenus par le biais de tests de dépistage plus classiques.

Six to eight people are affected by Chagas disease worldwide. Most of the patients are found in South America; however, more and more countries in the north are confronted with this infection that presents great difficulties both in the diagnosis and in the treatment. Despite significant technological advances in recent years, improved diagnosis is a major challenge in the management of patients with Chagas disease. In a first part, we present our studies about the development of a new diagnostic test based on the direct identification of parasitic antigens present in the serum. We analyzed the culture supernatant of cells infected with T.cruzi by mass spectrometry and we identified soluble parasitic proteins. Subsequently, we showed that Chagasin, a parasitic protease, which could be good serum marker of T. cruzi infection.In second part, we present a study that allow the interpretation and evaluation of a new immunoblot assay ''Western Chagas IgG'' (CE mark) by LDBIO Diagnostics (Lyon, France). This assay based on trypomastigote and amastigote extract manufactured by the laboratory of parasitology and mycology of Pitié Salpétrière hospital. These results show that this assay has sensitivity and specificity values close to 100% and is considered an excellent serological assay intended for confirmatory testing of a positive or equivocal result obtained through classic screening tests.