Thèse soutenue

Biosynthèse, rôle(s) et régulation du pilus PI-2b dans le clone hypervirulent ST-17 de Streptococcus agalactiae
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Auteur / Autrice : Noémi Réka Szili
Direction : Shaynoor Dramsi
Type : Thèse de doctorat
Discipline(s) : Aspects moléculaires et cellulaires de la biologie. Microbiologie procaryote et eucaryote
Date : Soutenance le 07/06/2017
Etablissement(s) : Sorbonne Paris Cité
Ecole(s) doctorale(s) : École doctorale Bio Sorbonne Paris Cité (Paris ; 2014-....)
Partenaire(s) de recherche : Laboratoire : Unité Biologie des bactéries pathogènes à Gram-positif (Paris)
établissement de préparation : Université Paris Diderot - Paris 7 (1970-2019)
Jury : Président / Présidente : Isabelle Martin-Verstraete
Examinateurs / Examinatrices : Shaynoor Dramsi, Isabelle Martin-Verstraete, Hélène Bierne, Michel-Yves Mistou, Anne-Marie Di Guilmi
Rapporteurs / Rapporteuses : Hélène Bierne, Michel-Yves Mistou

Résumé

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Streptococcus agalactiae (Streptocoque du Groupe B, SGB) est une bactérie pathogène opportuniste à Gram-positif responsable principalement d’infections néonatales. Les études épidémiologiques ont montré que les souches appartenant au complexe clonal 17 (ST-17) sont responsables de 80% des cas de méningites tardives. La génomique comparative a permis de mettre en évidence des gènes codant pour des protéines de surface spécifiques au clone ST-17 comme les adhésines Srr2 et HvgA. On y trouve également un locus codant pour un pilus spécifique appelé PI-2b, qui constitua l’objet principal de cette thèse. Ce locus PI-2b est ubiquitaire dans les souches ST-17, mais on le retrouve également dans quelques souches humaines non-ST-17 comme la souche A909 ainsi que dans les souches bovines. Dans la première partie de ce travail, nous avons comparé l’expression du pilus PI-2b dans les souches ST-17 versus non-ST-17. L’expression du locus PI-2b, bien que variable au sein du complexe ST-17, est plus faible que dans les souches non-ST-17. Dans la souche représentative du ST-17 BM110, l’expression du gène spb1codant pour la piline majeure est 4-6 fois plus faible que dans la souche A909. Nous avons montré que cet effet est dû à la présence d’une séquence de 43 paires de base en amont du locus PI-2b, formant une structure de type tige-boucle, qui empêche la transcription provenant du locus situé en amont codant pour l’antigène B. Grâce à des expériences de fusion transcriptionnelle avec un gène rapporteur codant pour la GFP, nous avons montré qu’une région étendue du promoteur ainsi que des facteurs spécifiques à S. agalactiae sont nécessaires pour l’expression maximale du locus PI-2b. Le niveau maximal de transcription du pilus PI-2b est observé à 37 °C. L’ensemble de nos résultats suggère une régulation complexe de l’expression du locus PI-2b, dont l’expression plus faible dans les souches ST-17, pourrait conférer aux bactéries la capacité d’échapper au système immunitaire de l’hôte et de disséminer plus efficacement. La deuxième partie de ce travail a porté sur le rôle des gènes orf, lep et san1519 dont la fonction sur la biosynthèse du pilus n’était pas connue. Nous avons montré que les gènes orf et lep sont importants pour l’expression et la polymérisation du pilus PI-2b. Nous avons montré que lep code pour une signal peptidase fonctionnelle qui participe à la maturation de la piline majeure. Quant à orf, nos autres résultats ainsi le chevauchement traductionnel entre ce gène et lep, conservé dans d’autres espèces de streptocoques, suggèrent un rôle dans la stabilisation des ARNm