Intérêt de la vectorisation du t-PA au thrombus : exemple du Fucoidan aminé

Interest of vectorization of t-PA to the thrombus : example of the amino Fucoidan

• Auteur / Autrice : Radouane Ghebouli
• Direction : Jean-Baptiste Michel
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Médecine. Pathologie cardiovasculaire
• Date : Soutenance le 20/12/2016
• Etablissement(s) : Sorbonne Paris Cité
• Ecole(s) doctorale(s) : École doctorale Hématologie, oncogenèse et biothérapies (Paris ; 2014-....)
• Partenaire(s) de recherche : Equipe de recherche : Laboratoire de recherche vasculaire translationnelle (Paris ; 2014-....)
• Partenaire(s) de recherche : établissement de préparation : Université Paris Diderot - Paris 7 (1970-2019)
• Jury : Président / Présidente : Michel Plotkine
• Jury : Examinateurs / Examinatrices : Jérôme Parcq
• Jury : Rapporteur / Rapporteuse : Sophie Susen, Cécile Oury

Mots clés

Mots clés contrôlés

Fibrinolyse

Thérapeutique

Maladies cérébrovasculaires

Lysine

Fucoïdane

Thrombolyse

Activateur tissulaire du plasminogène

Thrombus

Thrombose

Mots clés libres

Caillot

Fucoidane aminé

Clot

Amino fucoidan

Résumé

Les accidents vasculaires cérébraux (AVC) ischémiques, l’infarctus du myocarde (IDM) et l’embolie pulmonaire (EP) sont la première cause de mortalité et de morbidité dans le monde. Leur prise en charge est limitée à la recanalisation des vaisseaux occlus par le thrombus. La thrombolyse intraveineuse par le rt-PA (l’activateur tissulaire du plasminogène recombinant) est le seul traitement médicamenteux utilisé dans ces situations d’urgences vasculaires. En dépit de ces bénéfices, cette thérapie s’entrave de plusieurs effets délétères principalement d’un risque d’hémorragie cérébrale. Augmenter le rendement fibrinolytique du rt-PA via sa vectorisation sans augmenter ses effets délétères serait d’un grand intérêt. Le Fucoidane, un polysaccharide anionique extrait principalement des algues brunes, ayant une affinité de l’ordre du nanomolaire à la P-sélectine, a démontré un ciblage spécifique du thrombus in vivo. Dans notre travail, nous avons développé une molécule bipolaire associant le Fucoidane comme vecteur au thrombus, aminé par des lysines en N–terminales pour lier le rt-PA exogène. Le potentiel de vectorisation du t-PA par le Fucoidane aminé ainsi que la preuve du concept ont été validé par notre travail. Nous avons montré sur des modèles de thrombi in vitro une accélération de lyse des thrombi, et in vivo une augmentation de l’efficacité thrombolytique du t-PA, couplé au Fucoidan aminé, par injection périphérique.

Acute ischemic stroke (AIS), acute myocardial infarction (AMI), and pulmonary embolism (PE) are the main cause of mortality and morbidity worldwide. Thrombolysis by intravenous injection (IV) of recombinant tissue plasminogen activator (rt-PA) remains the most common non-interventional treatment to recanalize vessels occluded. However, Its use is limited by significant drawbacks, including bleeding complications. Recent studies showed that Fucoidan (sulfated polysaccharides extracted from brown algae) target in vivo intraluminal thrombus.In this study, we have developed a bipolar construct associating Fucoidan, able to target the thrombus, and a NH2 exposing lysine platform able to bind to t-PA. We hypothesize that this construct was able to vectorize t-PA to the thrombus, would increase its fibrinolytic efficacy and avoid its deleterious effects. In vitro assays, t-PA complexed to amino Fucoidan has shown its over thrombolytic superiority as compared to tPA alone. In vivo mesenteric, arterial and deep vena cava thrombosis and thrombolysis, vascular reperfusion was significantly increased in mice treated with amio Fucoidan complexed to t-PA as compared in mice treated by t-PA alone. This data demonstate that amino Fucoidan is an excellent vector of t-PA to the thrombus.