Développement de méthodes de référence pour spectrométrie de masse pour le dosage de biomarqueurs de la maladie d'Alzheimer

Development of reference methods for mass spectrometry for the assay of Alzheimer's disease biomarkers

• Auteur / Autrice : Pauline Bros
• Direction : Christophe Hirtz
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Biologie Santé
• Date : Soutenance le 31/05/2016
• Etablissement(s) : Montpellier
• Ecole(s) doctorale(s) : Sciences Chimiques et Biologiques pour la Santé (Montpellier ; Ecole Doctorale ; 2015-....)
• Partenaire(s) de recherche : Laboratoire : Laboratoire national de métrologie et d'essais (France) - Cellules Souches- Plasticité Cellulaire- Médecine Régénératrice et Immunothérapies
• Jury : Président / Présidente : Sylvain Lehmann
• Jury : Examinateurs / Examinatrices : Christophe Hirtz, Sylvain Lehmann, Ingrid Zegers, Jérôme Lemoine, Virginie Milena Brun, Vincent Delatour, Odile Schiltz, François Becher
• Jury : Rapporteurs / Rapporteuses : Ingrid Zegers, Jérôme Lemoine

Mots clés

Mots clés contrôlés

Protéine amyloïde bêta

Protéine tau

Protéomique

Marqueurs biologiques

Spectrométrie de masse

Alzheimer, Maladie d'

Mots clés libres

Maladie d'Alzheimer

Spectrométrie de masse

Biomarqueurs

Protéomique clinique

Traçabilité métrologique

Alzheimer's disease

Mass spectrometry

Biomarkers

Clinical proteomics

Metrological traceability

Résumé

En raison du vieillissement de la population, la maladie d’Alzheimer (MA) est devenue un problème majeur en santé public. Le dosage des biomarqueurs présents dans le liquide céphalorachidien (Ab 1-42, tau et hepcidine) étant de bons indicateurs précoces de l’apparition et de l’évolution de la MA, il paraît essentiel de disposer de mesures fiables. Etablir la traçabilité métrologique des résultats aux unités du système international par le biais de méthodes de référence primaires ou de matériaux de référence certifiés d’ordre supérieur est un moyen privilégié pour évaluer et améliorer la fiabilité et la comparabilité des résultats dans le temps et entre les laboratoires. Des méthodes de dosages par LC-MS/MS pour ces trois biomarqueurs ont été développées et validées. Pour le dosage de l’hepcidine, la pureté de l’étalon peptidique a fait l’objet d’une caractérisation approfondie par spectrométrie de masse haute résolution qui permettra de standardiser les dosages de routine à l’échelle internationale.Mots clés : Peptides b amyloïdes, Protéine tau, Hepcidine, Biomarqueurs, Protéomique Clinique, Traçabilité métrologique, Spectrométrie de masse

Due to the aging of population, Alzheimer’s disease (AD), is becoming a major public health concern. Measurement of biomarkers (Amyloid Beta, tau and hepcidin) in cerebrospinal fluid being early diagnostic indicators of AD, reliable measurements are needed to detect and quantify them accurately. Establishing metrological traceability of results to the International System of Units through primary reference methods or higher-order certified reference materials is a privileged mean to assess and improve results accuracy and comparability across laboratories. Assays for these three biomarkers were set up and validated by LC-MS/MS. The hepcidin standard was further characterized by high resolution mass spectrometry, paving the road toward standardization at the international scale of results.Key words : b amyloids peptides, Tau protein, Hepcidin, Biomarkers, Clinical proteomic, Metrological traceability, Mass spectrometry