Évaluation de nouvelles stratégies d’immunothérapies anti-tumorales utilisant des peptides vaccinaux ou des anticorps monoclonaux

Evaluation of novel anti-tumoral strategies using peptide or monoclonal antibody immunotherapies

• Auteur / Autrice : Rami Mustapha
• Direction : Nadirah Delhem
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Aspects moléculaires et cellulaires de la biologie
• Date : Soutenance le 16/12/2016
• Etablissement(s) : Lille 1
• Ecole(s) doctorale(s) : École doctorale Biologie-Santé (Lille ; 2000-....)
• Partenaire(s) de recherche : Laboratoire : Mécanismes de la tumorigenèse et thérapies ciblées (M3T)

Mots clés

Mots clés contrôlés

Virus d'Epstein-Barr

Cancer

Partie nasale du pharynx

Immunothérapie anticancéreuse

Inhibiteurs

Galectines

Cellules suppressives

Mots clés libres

Exosomes tumoraux

Vaccin peptidique

Résumé

Le système immunitaire reconnait les cellules tumorales mais il est régulé par plusieurs facteurs tels les cellules T Régulatrices (Tregs). La galectine (Gal)-9 est une lectine aux propriétés immunosuppressives exprimée par les cellules cancéreuses et les cellules immunitaires dont les Tregs. Nous avons cherché à confirmer le rôle fonctionnel de la Gal-9 dans les Tregs. Puis nous avons testé la capacité d’un anticorps anti-Gal-9 (GalNab1) à bloquer les fonctions suppressives de la Gal-9 ou des Tregs et son effet anti-tumorale. Nous avons prouvé que les Tregs expriment et secrètent abondamment la Gal-9. GalNab1 antagonise l’effet de la Gal-9 recombinante (r) sur les PBMCs et inhibe les fonctions suppressives des Tregs. Le blocage de la rGal-9 en culture favorise la croissance des Th1 sans induire de cytotoxicité et bloque les fonctions des exosomesGal-9+ dérivés de Carcinome du Nasopharynx (CNP). In-vivo, dans un modèle de souris SCID humanisé, GalNab1 limite la croissance du CNP. Le CNP est associé au virus d’Epstein-Barr (EBV) dont il exprime plusieurs protéines. L’utilisation d’une stratégie de vaccination peptidique ciblant les lymphocytes TCD4+ Th1 est envisagée. Six peptides dérivés des antigènes de latence II d’EBV et promiscuous pour HLA-II ont été sélectionnés et assemblés en cocktail, dont la capacité à induire une sécrétion d’IFN-γ par les PBMCs a été validé. Des lignées Th1 spécifiques du cocktail présentent une forte capacité cytotoxique vis-à-vis de lignées de CNP tout en résistant aux effets des exosomes tumoraux autologues. In-vivo, le cocktail permet de maîtriser la croissance tumorale, et ex-vivo, de réactiver la réponse T mémoire chez les patients.

The immune system can recognize and eliminate cancer cells but is held back by inhibitory factors such as Regulatory T cells (Tregs). Gal-9 is a β-galactoside binding lectin with immunosuppressive capabilities expressed by cancer cells and immune cells including Tregs. NPC is a malignant epithelial cancer which is almost always associated with Epstein Bar Virus (EBV) and expresses several viral proteins. Numerous vaccines targeting different EBV peptides had limited success in clinical trials. First part: we aimed to confirm the role of Gal-9 in human Treg function. Then we tested the capabilities of an anti-human-Gal-9 antibody (mAb) to block Gal-9 suppressive function and its effect on Treg function and the anti-tumoral response. We proved that Gal-9 is expressed and secreted by Tregs at a high level. The mAb antagonized the function of recombinant rGal-9 on PBMCs. Moreover, the mAb inhibited the immuno-suppressive function of Tregs. Gal-9 blocking in PBMC culture promoted a Th1 response without inducing toxicity. We used the mAb to inhibit hNPC derived exosomes. In-vivo, the mAb limited the growth of hNPC tumors in humanized SCID mice. Second part: CD4+ T cell response is essential in managing NPC. The use of a CD4+ T cell response inducing peptide cocktail vaccination strategy was tested here. 6 HLA II promiscuous peptides derived from the 3 EBV latency II antigens were generated. These peptides induced IFNγ secretion by PBMCs. Generated peptide-specific CD4+ T cell lines showed highly cytotoxicity against NPC cell lines and resistance to hNPC exosomes. Invivo, the cocktail restrained tumor growth. Exvivo, it reactivated NPC patients’ memory T cells.