Sélection et capture de biomarqueurs moléculaires et cellulaires à partir d'un fluide complexe
Auteur / Autrice : | Helene Cayron |
Direction : | Christophe Vieu, Aline Cerf |
Type : | Thèse de doctorat |
Discipline(s) : | Nanophysique |
Date : | Soutenance le 28/10/2016 |
Etablissement(s) : | Toulouse, INSA |
Ecole(s) doctorale(s) : | Sciences de la Matière |
Partenaire(s) de recherche : | Laboratoire : Laboratoire d'analyse et d'architecture des systèmes [Toulouse] / LAAS |
Jury : | Président / Présidente : Gilles Favre |
Examinateurs / Examinatrices : Christophe Vieu, Aline Cerf, Harold Craighead, Stephanie Descroix, Jose Moran-Mirabal | |
Rapporteurs / Rapporteuses : Catherine-Alix Panabieres, Isabelle Sagnes |
Mots clés
Résumé
Ce travail de thèse s'est axé autour de deux approches technologiques issues du domaine de la microfabrication pour la sélection et la capture de biomarqueurs circulants dans le sang. A l'échelle moléculaire, un module d'assemblage capillaire dirigé a été implémenté dans un automate de tamponnage moléculaire puis validé en utilisant un modèle simple, permettant l'isolement et l'étirement de biomolécules individuelles de manière entièrement contrôlée et automatisée à large échelle. Nous avons ensuite appliqué cette technologie à des biomarqueurs moléculaires d'intérêt tels que les ADN libres contenus dans du sang complet, démontrant la capacité de la technique à isoler des acides nucléiques dans un fluide complexe contenant de nombreux éléments cellulaires . A l'échelle cellulaire, une approche innovante pour la sélection et la capture de Cellules Tumorales Circulantes a été développée. Le microdispositif mis au point est fabriqué par écriture laser à 3 dimensions et permet le piégeage physique de ces cellules dans du sang complet non traité tout en les préservant pour une récupération et analyse ultérieure. Après adaptation du microdispositif pour maximiser son efficacité de capture in vitro, une première preuve de concept de capture sélective de cellules cancéreuses dans du sang complet non traité a été réalisée. U n premier prototype pour une utilisation in vivo a été mi s au point et validé in vitro sur la capture de cellules cancéreuses dans du milieu de culture.