Protéomique des lipoprotéines de haute densité (HDL) : biomarqueurs et applications thérapeutiques

Proteomic of high density lipoproteins (HDL) : biomarkers and therapeutic applications

• Auteur / Autrice : Devy Diallo
• Direction : Olivier Meilhac
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : [Pathologie cardio-vasculaire]
• Date : Soutenance en 2015
• Etablissement(s) : Sorbonne Paris Cité
• Ecole(s) doctorale(s) : École doctorale Hématologie, oncogenèse et biothérapies (Paris ; 2014-....)
• Partenaire(s) de recherche : autre partenaire : Université Paris Diderot - Paris 7 (1970-2019)

Mots clés

Mots clés contrôlés

Sepsie

Athérosclérose

Espèces réactives de l'oxygène

Myocytes du muscle lisse

Anévrysme

Stress oxydatif

Lipoprotéines HDL

Résumé

Au cours de cette thèse, nous nous sommes attachés à identifier des biomarqueurs et en particulier des modifications des lipoprotéines de haute densité (HDL) en situation d'agression : protéolytique, oxydative et bactérienne. Dans un premier temps, nous nous sommes intéressés aux marqueurs solubles issus de la protéolyse de l'hémoglobine dans l'athérothrombose carotidienne et dans l'anévrysme de l'aorte abdominale (AAA). Nous avons identifié un peptide de 3327 Da issu de la protéolyse de la chaine alpha de l'hémoglobine par l'élastase leucocytaire, localisé majoritairement dans la couche luminale du thrombus d'AAA et dans la zone hémorragique des plaques carotidiennes. Dans un deuxième travail réalisé sur des patients porteurs d'un AAA, nous avons montré que l'activation neutrophilaire est un élément clé de l'environnement pro-oxydant dans les thrombus AAA participant aux phénomènes de modifications et de dysfonctionalité des HDL dans cette pathologie. En effet, nous avons montré chez ces patients une diminution des propriétés antioxydantes des HDL vis-àvis de l'oxydation des LDL et de la production de formes réactives de l'oxygène par les cellules musculaires lisses. Ces patients présentent aussi une réduction du taux des petites sous-fractions de HDL (antiathérogènes). Cette activation neutrophilaire chronique dans la pathologie anévrysmale pourrait être reliée au passage de bactéries parodontales dans la circulation sanguine. Dans un dernier travail, nous avons analysé les modifications des HDL dans un contexte d'infection bactérienne sévère, le choc septique. Dans cette étude, nous avons montré qu'en plus d'avoir un taux très bas de HDL, les patients septiques présentaient une variation du profil des sous-fractions de HDL : une diminution des petites HDL au profit des HDL de grande taille. Nous avons pu également démontrer in vitro que cette modification serait en partie liée à la fixation des composants bactériens sur les HDL.

During this thesis, we aimed of identifying biomarkers and particularly changes in high-density lipoproteins (HDL) in a situation of proteolytic, oxidative and bacterial aggression. In the first study, we identified soluble markers resulting from the proteolysis of hemoglobin in carotid atherothrombosis and abdominal aortic aneurysms (AAA). A peptide with a mass of 3327 Da was characterized by proteomics predominantly in the luminal layer of the AAA thrombus, and in the hemorrhagic area of carotid plaques. This peptide is issued from the proteolysis of the alpha chain of hemoglobin by the action of leukocyte elastase. In the second study, we have shown that the neutrophil activation observed in AAA patients largely contributes to the pro-oxidant state of this pathology and that this environment plays an active role in HDL modification and dysfunction in AAA. Indeed, we have shown the loss of their protective effect on LDL oxidation and on production of reactive oxygen species by smooth muscle cells. A decrease in circulating small HDL fractions (anti-atherogenic) was also observed in AAA patients. In AAA, the chronic neutrophil activation could be linked to the entry of periodontal bacteria in the bloodstream. In the last study, we analyzed modifications of HDL in the pathological context of severe infection: the septic shock. We have shown that besides having very low circulating levels of HDL, small HDL were decreased in favor of large HDL. We also observed in vitro that this phenomenon could result from the binding of bacterial compounds to HDL particles.