Rôle de protéines clés de signalisation dans la qualité de cellules de reproduction destinées à être cryopréservées

Role of signaling key proteins in the quality of reproduction cells destined to be cryopreserved

• Auteur / Autrice : Thi Mong Diep Nguyen
• Direction : Elisabeth Blesbois
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences de la vie
• Date : Soutenance le 29/09/2015
• Etablissement(s) : Tours
• Ecole(s) doctorale(s) : École doctorale Santé, Sciences Biologiques et Chimie du Vivant (Centre-Val de Loire ; 2012-....)
• Partenaire(s) de recherche : Equipe de recherche : Physiologie de la Reproduction et des Comportements (Tours)
• Jury : Président / Présidente : Anne Duittoz
• Jury : Examinateurs / Examinatrices : Marc Moreau, Jean-Jacques Lareyre
• Jury : Rapporteur / Rapporteuse : Joël Drevet, Marc Moreau

Mots clés

Mots clés contrôlés

Embryon humain -- Cryoconservation

Animaux -- Ressources génétiques -- Cryoconservation

Capacitation

Acrosome

Phosphorylation

Complément (immunologie) -- Activation

Metformine

AMP kinase

Mots clés libres

Reproduction

AMPK

Metformine

AICAR

Compound C

CaMKK

CaMKI.

Résumé

L'AMPK est un senseur cellulaire des réserves énergétiques de l’organisme. Les spermatozoïdes, mobilisent beaucoup d’énergie pour leur mobilité et la fécondation de l’ovocyte. L’objectif de ce travail était de caractériser et décrire des éléments clés de la voie de signalisation de l'AMPK, de comprendre leur implication dans les spermatozoïdes de coq et d’étudier comment leurs modulateurs peuvent impacter les fonctions des gamètes conservés in vitro. Nous avons montré une augmentation de la mobilité et de la réaction acrosomique dans les spermatozoïdes exposés à l'AICAR et à la metformine, des activateur de l’AMPK, y compris après avoir été congelés. Ces activateurs ont partiellement restauré les activités des enzymes antioxydantes (SOD, GPx, GR): et diminué les ROS et la LPO dans les spermatozoïdes décongelés. Nous avons établi la présence des CaMKKs (α et β) et de CaMKI dans les spermatozoïdes et leur rôle lié au calcium extracellulaire (via les canaux calcique SOCs) dans la voie de régulation de l'AMPK et dans la mobilité et la réaction acrosomique des spermatozoïdes. En conclusion, ce travail confirme le rôle de différents acteurs de signalisation liés au métabolisme énergétique et aux flux calciques dans les fonctions des spermatozoïdes.

AMPK is a cellular sensor of body energy reserves. Spermatozoa mobilize a lot of energy for their motility and the fertilization of the oocyte. The objective of this work was to characterize and describe key elements of the signaling pathway of AMPK, understand their involvement in chicken spermatozoa and study how their modulators may impact the functions of in vitro preserved gametes. We showed an increase in mobility and acrosome reaction in spermatozoa exposed to AICAR and metformin, activators of AMPK, including after freezing. These activators have partially restored the activities of antioxidant enzymes (SOD, GPx, GR): and decreased ROS and LPO in thawed spermatozoa. We have established the presence of CaMKKs (α and β) and CaMKI in sperm and their role related to extracellular calcium (via calcium channels SOCs) in the control channel of AMPK and in motility and acrosome reaction of spermatozoa. In conclusion, this work confirms the role of different signaling actors related to energy metabolism and calcium fluxes in spermatozoa functions.