Stratégie vaccinale contre la toxoplasmose : ciblage d'un antigène paratisaire aux cellules dendritiques par un fragment d'anticorps de type scFv

Vaccine strategy against toxoplasmosis : parasite antigen targeting to dendritic cells by scFv fragment antibody (single chain antibody fragment)

• Auteur / Autrice : Zineb Lakhrif
• Direction : Isabelle Dimier-Poisson, Nicolas Aubrey
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Sciences de la vie et de la santé, spécialité Immunologie et vaccinologie
• Date : Soutenance le 11/12/2015
• Etablissement(s) : Tours
• Ecole(s) doctorale(s) : École doctorale Santé, Sciences Biologiques et Chimie du Vivant (Centre-Val de Loire)
• Partenaire(s) de recherche : Equipe de recherche : Infectiologie et santé publique (Tours)
• Jury : Président / Présidente : Jacques Chandenier
• Jury : Examinateurs / Examinatrices : Marie Noëlle Mevelec, Philippe Billiald
• Jury : Rapporteurs / Rapporteuses : Thierry Chardès, Isabelle Schwartz-Cornil

Mots clés

Mots clés contrôlés

Toxoplasmose

Vaccins antiparasitaires

Ciblage d'un gène

Immunité cellulaire

Toxoplasma gondii

Antigènes CD

Cellules dendritiques

Toxoplasmose

Mots clés libres

Toxoplasmose

SAG1

Cellules dendtiriques

Ciblage

DEC205

"scFv"

Toxoplasmosis

SAG1

Dendtirc cells

Targeting

DEC205

"scFv"

Résumé

La toxoplasmose est un problème majeur de Santé Publique et notamment en médecine humaine. Le développement de vaccins est donc d’une grande priorité. L’efficacité de la stratégie vaccinale contre Toxoplasma gondii dépend de l’induction des réponses immunitaires muqueuse et systémique Th1. Les cellules dendritiques (CDs) ont un rôle essentiel dans l'orchestration de l’immunité innée et l’induction de l’immunité adaptative spécifique à Toxoplasma gondii. Dans cette étude, nous explorons une stratégie de vaccination originale qui consiste en l’administration par voie systémique et muqueuse de protéines de fusion capables de cibler l’antigène de surface SAG1 aux CDs, en utilisant un fragment d'anticorps de type scFv dirigé contre le récepteur d'endocytose DEC205. Nos résultats montrent que le ciblage de SAG1 aux DCs par le fragment scFv via la voie intranasale et sous-cutanée, réduit dramatiquement la charge parasitaire cérébrale par rapport à l’antigène non ciblé et est plus efficace que l’immunisation par la voie intranasale ou la voie sous-cutanée seule. Le ciblage des DCs potentialise la réponse immunitaire vers un profil Th1 par la production d’IFN-γ, d’IL-2, d’IgG2a sériques, tout en favorisant la production IgA muqueuses spécifiques. Parallèlement, nous avons montré qu’il était possible de conférer une reconnaissance par la protéine L à toutes les chaînes légères kappa, ce qui permettra dans l’avenir de purifier plus efficacement les antigènes ciblés par chromatographie d’affinité avec la protéine L.

Toxoplasmosis is a major public health problem and the development of a human vaccine is of high priority. Efficient vaccination against Toxoplasma gondii (T. gondii) requires both a mucosal and systemic Th1 immune response. Moreover, dendritic cells (DCs) play a critical role in orchestrating the innate immune functions and driving specific adaptive immunity to T. gondii. In this study, we explore an original vaccination strategy that combines administration via mucosal and systemic routes of fusion proteins able to target the major T. gondii surface antigen SAG1 to DCs using an antibody fragment scFv directed against DEC205 endocytic receptor. Our results show that SAG1 targeting to DCs by scFv via intranasal and subcutaneous administration improved protection against chronic T. gondii infection. A marked reduction in brain parasite burden is observed when compared with the intranasal or the subcutaneous route alone. DC targeting improved both local and systemic humoral and cellular immune responses and potentiated more specifically the Th1 response profile by more efficient production of IFN-γ, IL-2, IgG2a and nasal IgA. In parallel, we found a strategy to confer PpL recognition to all kappa chains. Therefore, affinity chromatography on protein L (PpL) matrix could be used to get easily highly purified targeted proteins.