Expression et valeur pronostique du couple CXCL 12/CXCR 4 dans les carcinomes épidermoïdes de la sphère ORL chez l'homme

• Auteur / Autrice : Florian Clatot
• Direction : Fabrice Jardin
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Biologie - Oncologie moléculaire
• Date : Soutenance en 2014
• Etablissement(s) : Rouen
• Ecole(s) doctorale(s) : École doctorale Normande de biologie intégrative, santé, environnement (Mont-Saint-Aignan, Seine-Maritime)

Mots clés

Mots clés contrôlés

Microdissection

Expression génique

Transcriptome

Micro-environnement tumoral

Cancer cervicofacial

Maladies oto-rhino-laryngologiques

Résumé

La chémokine CXCL 12 et ses récepteurs CXCR 4 et CXCR 7 sont impliqués dans de nombreux modèles de dissémination métastatique en cancérologie. Nous avons évalué l’expression et la valeur pronostique de l’axe CXCL 12/CXCR 4 à partir d’une cohorte de patients traités à visée curative pour un carcinome épidermoïde ORL. Sur une série de 71 patients, nous avons pu établir que le taux d’expression intratumoral de CXCL 12 évalué par RT-PCR quantitative était un facteur pronostique majeur et indépendant. L’analyse par qRT-PCR haut débit puis clustering non supervisé de l’expression de 42 gènes (impliqués dans l’angiogénèse, l’inflammation, le métabolisme, l’hypoxie et les intéractions à la matrice) pour 61 échantillons, nous a permis d’identifier 2 groupes de gènes présentant une probabilité d’évolution métastatique très différente. Puis, un score basé sur l’expression de 9 gènes et capable de prédire à 90% à quel groupe un échantillon donné appartient a été développé. Au niveau tissulaire, l’analyse après microdissection de 23 échantillons a confirmé que le stroma péri-tumoral produit la majorité de CXCL 12, et a permis de montrer de façon originale que CXCR 4 est aussi exprimé au niveau du stroma et non de la tumeur. CXCR 7 ne présente pas d’expression différentielle entre tumeur et stroma. Enfin, l’hyperméthylation du promoteur de CXCL 12, évaluée par pyroséquençage, n’expliquait l’hypoexpression de CXCL 12 que pour 20% des tumeurs. Dans leur ensemble, ces résultats suggèrent une fonction de gène suppresseur de tumeur du gène CXCL 12 dans les carcijnomes épidermoïdes de la sphère ORL et justifient une évaluation prospective de sa potentielle utilisation à visée pronostique.

The CXCL 12 chemokine and its receptors CXCR 4 and CXCR 7 are involved in many models of metastatic spread in cancer. Based on a cohort of patients treated for a curative intent for a head and neck cancer, we assessed the expression and the prognostic value of the CXCL 12/CXCR 4 axis in this setting. In our cohort of 71 patients we showed that the intratumoral level of expression of CXCL 12 assessed by quantitative PCR was a strong and independent prognostic factor. Using a high-throughput qRT-PCR, we performed an unsupervised clustering analysis based on the expression of 42 genes (involved in hypoxia, metabolism, matrix interactions, inflammation and angiogenesis) for 61 patients. We identified 2 groups of genes that were related to metastatic evolution. Next, we established a 9-gene model that was capable of classifying the samples into the 2 clusters with 90% accuracy. At the tissue level, the analysis of 23 samples after microdissection confirmed that the stroma is the main provider of CXCL 12. It also showed in a pioneering way that CXCR 4 was mainly produced by the stroma instead of the tumor. CXCR 7 expression did not differ between the 2 compartments. Finally, the methylation of the CXCL 12 promoter assessed by pyrosequencing could only explain the low intra-tumoral expression of this gene in 20% of cases. Taken together, these results suggest that CXCL 12 may be a tumor suppressor gene in head and neck cancers. A prospective evaluation of the CXCL 12 prognostic value is needed.