Epidémiologie moléculaire de la résistance de Leishmania aux antimoniés en France et au Maghreb

Molecular epidemioliogy of Leishmania resistance to antimonials in Maghreb and France

• Auteur / Autrice : Fakhri Jeddi
• Direction : Charles Mary
• Type : Thèse de doctorat
• Discipline(s) : Pathologie humaine. Maladies infectieuses
• Date : Soutenance le 11/12/2014
• Etablissement(s) : Aix-Marseille
• Ecole(s) doctorale(s) : École Doctorale Sciences de la vie et de la santé (Marseille)
• Partenaire(s) de recherche : Laboratoire : Interactions Hôte-parasite/ Pharmacologie et Thérapeutique (Marseille)
• Jury : Président / Présidente : Pierre Marty
• Jury : Examinateurs / Examinatrices : Charles Mary, Pierre Marty, Christophe Ravel, Montserrat Gallego, Karim Aoun, Renaud Piarroux
• Jury : Rapporteurs / Rapporteuses : Christophe Ravel, Montserrat Gallego

Mots clés

Mots clés contrôlés

pharmacologie

Antiprotozoaires

Résistance aux substances

Antimoine

Épidémiologie moléculaire

Leishmaniose

Mots clés libres

Leishmania

Antimoniés

Résistance

Marqueurs moléculaires

Maghreb

Sud de la France

Hétérogénéité

Leishmania

Antimonials

Resistance

Molecular markers

Maghreb

Southern France

Heterogeneity

Résumé

Des approches moléculaires ont permis d'identifier des gènes impliqués dans la résistance de Leishmania aux antimoniés ; les deux phénomènes moléculaires les plus décrits correspondent à une amplification de l'ADN (augmentation du nombre de copies d'un gène ou d'une région du génome) et une surexpression de l'ARNm. Nous avons ainsi sélectionné 14 gènes parmi les plus décrits dans la littérature afin d'étudier ces caractères moléculaires chez 149 isolats cliniques de leishmanies provenant du Maghreb et du sud de la France.Nous avons comparés les données moléculaires avec la technique de référence en pratiquant des tests in vitro sur macrophages infectés pour 47 isolats. Nous avons ainsi pu fixer un seuil significatif pour l'amplification et la surexpression pour chacun des gènes étudiés permettant d'analyser les données moléculaires des 149 isolats. Nos résultats montrent :- Le caractère hétérogène et multifactoriel des marqueurs moléculaires de résistance. - Une surexpression portant sur plus de deux gènes n'est présente que chez des isolats résistants. - Le profil des marqueurs moléculaires varie en fonction de la zone géographique et de l'espèce. Notre étude effectuée sur un nombre important d'isolats cliniques montre la présence, la complexité et l'hétérogénéité des marqueurs moléculaires de résistance de Leishmania aux antimoniés au Maghreb et dans le sud de la France. La présence de ces caractères chez des isolats cliniques du Maghreb nécessite une vigilance quant à l'utilisation des antimoniés.

We assessed the involvement of reported antimonial-resistance genes on a extensive panel of Leishmania clinical isolates collected in Tunisia, Algeria and Southern France. We first examined the molecular status of 149 Leishmania field isolates. In total, we examined 14 genes via qPCR and qRT-PCR. We then compared the molecular patterns of 47 isolates cultured in our department against the phenotype determined via in vitro sensitivity test to Glucantime®. With this survey, we demonstrated the following findings:- Various gene associations were observed among the clinical isolates, thereby supporting the multifactorial characteristic of Leishmania resistance- All clinical isolates that exhibited significant overexpression of at least 2 genes displayed a resistant phenotype- Gene amplification and gene overexpression varied depending on the geographic area for Leishmania infantum isolates, and these gene variations depended on the species when comparing Leishmania infantum, Leishmania major and Leishmania killicki. Our multi-gene survey performed on an extensive panel of Leishmania clinical isolates demonstrates the presence, complexity and heterogeneity of resistance molecular markers in the Western Mediterranean area. Given the presence of molecular resistance patterns in isolates from the Maghreb, the use of antimonials should be vigilantly monitored in this area. The potential spread of Leishmania resistant strains could pose significant public health problems in the Maghreb region.