Thèse soutenue

Hsp33 contrôle la stabilité du facteur d'élongation-Tu et rétablit la croissance d'escherichia coli en l'absence des protéines chaperons majeures DnaK et Trigger Factor
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Auteur / Autrice : Nicolas Bruel
Direction : Pierre GenevauxMarie-Pierre Castanié-Cornet
Type : Thèse de doctorat
Discipline(s) : Microbiologie et génétique moléculaire
Date : Soutenance en 2013
Etablissement(s) : Toulouse 3

Mots clés

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Mots clés contrôlés

Résumé

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Le repliement intracellulaire des protéines nouvellement synthétisées est assisté par des réseaux cellulaires de protéines chaperons. Chez Escherichia coli, la coopération entre les protéines chaperons Trigger Factor (TF) et DnaK est prédominante dans ce processus. En accord avec ceci, la délétion simultanée des gènes codants pour ces deux protéines chaperons conduit à une croissance bactérienne très réduite et à l'accumulation d'un grand nombre de protéines cytoplasmiques sous forme d'agrégats. Au cours de cette étude, nous avons utilisé ces phénotypes afin de mettre en évidence des interactions potentielles au sein du réseau de protéines chaperons in vivo. Nous avons montré que la perte des protéines chaperons TF et DnaK, et donc des voies de repliements dans lesquelles elles sont impliquées, pouvait être secourue de façon efficace par la surexpression du chaperon Hsp33, connu pour être activable en réponse à un stress oxydatif sévère. En outre, la délétion du gène hslO, codant pour Hsp33, n'était plus tolérée en l'absence de TF et DnaK. Cependant, en comparaison avec d'autres protéines chaperons comme GroESL ou SecB, la suppression de ces phénotypes par Hsp33 n'a pas pu être attribuée à un éventuel chevauchement de fonctions avec DnaK et TF. Au contraire, nos résultats montraient qu' Hsp33 surexprimée fixait de façon spécifique le facteur d'élongation-Tu (EF-Tu) et favorisait sa dégradation par la protéase Lon. Cette action synergétique entre Hsp33 et Lon était responsable du rétablissement de la croissance bactérienne en l'absence de TF et DnaK, possiblement via le rétablissement du couplage entre la vitesse de traduction et les capacités de repliement des protéines nouvellement synthétisées du double mutant. Afin de soutenir cette hypothèse, nous avons ensuite montré que la surexpression de la toxine HipA qui inhibe EF-Tu, était aussi capable de supprimer le phénotype de thermosensibilité et de réduire significativement l'agrégation des protéines en l'absence de TF et DnaK.